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2005-09 荧光分析法 一、分子荧光的产生过程 二、荧光的产生与分子结构的关系 三、影响荧光强度的因素 一、仪器与结构流程 二、激发光谱与荧光光谱三、荧光分析法和应用 一、荧光的产生过程 Luminescence Process of Molecular Fluorescence 2.电子激发态的多重度 3.激发态→基态的能量传递途径 非辐射能量传递过程 辐射能量传递过程 速率竞争决定光活化电子能量迁移的途径！ 二、荧光的产生与分子结构的关系 Relation Between Fluorescence and Molecular Structure 2.有机化合物的结构与荧光 强荧光物质往往具备以下特征： 具有大的共轭 p 键结构； 具有刚性平面结构； 具有最低的单线电子激发态S1为p p*型 取代基团为给电子取代基 5.荧光的熄灭 一、仪器结构流程 仪器光路图 二、激发光谱与荧光光谱 Excitation Spectrum and Fluorescence Spectrum 3.激发光谱与发射光谱的关系 4. 测定波长的选择 三、荧光分析方法与应用 3.荧光分析法的应用 但在碱性溶液经光线照射发生分解作用或在酸性KMnO4氧化下都会生成荧光强度比维生素B2强得多的黄光素，并可溶于氯仿。利用此性质可提高测定的灵敏度和选择性。 荧光法测定抗坏血酸 Fluorescence research Key word: Fluorescen* Period: Jan/2005-Jun/ 2005 Data base: 美国化学会 ( ACS )数据库 3566 篇 WPS电子期刊全文数据库 206 篇 SDOS全文数据库（上交 镜像） 1890 篇 英国皇家化学会（RSC) 数据库 120 篇 研究与应用领域涉及：生命 环境 材料 等 “备”则“倍” 有准备、有规划的人生更精彩！ 尿液中维生素B2的测定 维生素B2（核黄素）在430 - 440 nm 蓝光照射下会发出绿色荧光，λem为535 nm。它在pH 6-7 的溶液中荧光强度最大，而在pH 11时荧光消失； (2)生物、医学研究 内源荧光与外源探针 蛋白荧光 膜探针 核酸探针 分子灯标 （molecular beacons） 分子传感器 （molecular chemosenors） 荧光共振能量转移（FRET）系统 GFP是一种在395nm的激发光下可以释放出绿色荧光的蛋白，现已广泛的应用于生物以及医学研究。该蛋白可以表达在真核细胞中，在和其他基因融合表达的情况下，可以活体示踪目的蛋白的定位以及活动. 通过跟踪发出的绿光来观察病毒在宿主体内的扩散途径；或者把GFP接合到一种蛋白质上并通过显微镜观察它在细胞内部的移动 从水晶水母体内第一次分离出荧光基因 日裔科学家下村修1962年首先在水母中发现GFP Martin Chalfie(沙尔菲)指出GFP的发光特性在生物示踪方面有极高价值； 商业用途：荧光鱼 改造后的GFP可发射其它颜色的荧光，允许科学家一次性跟踪一种以上的蛋白质。图片中美丽的“彩虹”就是大脑中的神经系统网络。 华裔科学家钱永健改造了GFP，使得它可以在不同的激发光下发红蓝等各色，并且更加易于使用，大大扩展了此类蛋白的应用。 www. probes. com 1.正确认识自我，尊重自我——人职和谐的基础 2.充分了解职场，努力做到人职匹配 3.适应社会需求与发展，选择最能发挥自己能力特长的职业。 没有最好的职业，只有最适合自己的职业，适合自己的才是最好的。 1.职业生涯开发与管理的观点是：只要开始，永远不晚； 只要进步，总有空间。 2.在职业生涯的道路上，重要的不是目前所处的位置， 而是迈出下一步的方向。 Instrumental Analysis 现代表征方法与技术------ Fluorescence Analysis 《荧光分析法》第三版 许金钩、王尊本主编，科学出版社 参考书 《Principles of Fluorescence Spectroscopy》(II、III), J. R. Laowisz, Kluwer Academic/Plenum Publisher 第一节 分子荧光原理 Principle of Fluorescence 第二节 分子荧光分析法 Fluorescence Analysis * 分子能级比原子能级复杂，分子所具有的能级数目远多于原子能级数目。在每