Part-I---分子本质精要.pptVIP

影响 Tm值的因素 ☆ 在 A, T, C, G 随机分布的情况下 ☆ GC%含量相同的情况下 GC%愈高 → Tm值愈大 AT形成变性核心，变性加快，Tm 值小 ☆ 小于100bp 的 D.S DNA分子比较 片段愈短， 变性愈快，Tm值愈小 ☆ 盐浓度的影响 当Na+浓度低 屏蔽作用小 斥力加强 Tm ↓ 2. DNA 分子的复性 (anneal or renaturation) D.S DNA S.S DNA Denaturation ▲ ▼ Renaturation 复性过程依赖于单链分子间的随机碰撞 ( Depends on the collision of complementary S.S. DNA ) 影响DNA复性过程的因素 ： 阳离子浓度 0.18 ~ 0.2M Na+ 可消除polydNt 间的静电斥力 复性反应的温度 Tm - 25℃ (60-65℃) 以消除S.S. DNA 分子内的部分二级结构 S.S. DNA分子的长度 S.S. DNA愈长 → 分子扩散愈慢 → 复性愈慢 S.S, DNA 的初始浓度 C0 DNA 分子中, dNt 的排列