HPLC性能检查和参数测定.docVIP

高效液相色谱仪的性能检查和色谱参数的测定 实验目的 熟悉高效液相色谱仪性能检查和色谱参数测定的方法 掌握高效液相色谱仪的一般使用方法 二、实验原理 1、性能检查：噪音、漂移、定性重复性、定量重复性、检测限； 2、色谱参数：理论塔板数（n）、理论塔板高度（H）、有效塔板数（neff），有效塔板高度（Heff），容量因子（k），分配系数比（?），分离度（R）。 三、色谱条件 色谱仪由岛津10ATvp泵、10ATvp紫外检测器及岛津ODS色谱柱（150×4.6mm，5?m）组成；流动相：甲醇-水（85:15，v/v）；流速：1ml/min；柱温：常温；检测波长：254nm；进样量：定量环20?l。 四、实验步骤 1、打开计算机、工作站，确认参数；打开泵电源（power），更换流动相，排气，设定流速，开泵（pump）；打开检测器电源，自检完毕后设定检测波长；采集基线，观察噪音和漂移，记录。 2、进样一次，出峰完毕后手动停止，保存。重复5~6次。 3、打开保存的色谱图，积分处理；打印一副色谱图和所有实验数据，老师审阅后签名。 4、关闭检测器，停泵，更换纯甲醇，排气，设定流速0.5ml/min，开泵，关闭工作站、计算机，用纯甲醇分别在Inject和Load位置清洗进样口。 5、计算性能指标（灵敏度，检测限，定性、定量重复性）。 6、以苯和萘的数据计算色谱参数。 五、数据处理要求 1、计算公式：