选修---DNA重组技术的基本工具技术方案.ppt

A T G C A T G C 连接酶连接磷酸二酯键 DNA连接酶的作用过程： 二、分子缝合针——DNA连接酶 作用部位： 是磷酸二酯键（扶手） 不是氢键（梯子） DNA连接酶将两条DNA链连接起来的酶。 连接黏性末端 连接黏性末端和平末端 分类 作用 E.coli DNA连接酶 连接酶种类： T4DNA连接酶 设想一 能否培养出具有抗虫 性状的抗虫棉呢？ 胰岛素是治疗糖尿病的特效药,长期以来只能从猪、牛等动物的胰腺中提取，产量低、成本高。而微生物生长迅速，容易控制。 于是科学家设想，若能将人的胰岛素基因导入微生物体内，并得以表达，就不仅能解决产量问题，还能大大降低生产成本，使药品价格大幅下降。 设想二 能否让微生物产生出人的 胰岛素等珍贵药物？ 烟草中含有的尼古丁是人类的健康杀手。 于是有人设想，将能够生产药物蛋白的基因导入烟草中，烟草就可以变成批量生产药物蛋白的工厂。 设想三 能否让烟草产生出已用蛋白呢？ 这些定向改造基因的设想能实现吗？ ——基因工程 经过多年的努力，科学家终于在20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术 基因工程的概念 基因工程：指按照人们的愿望,进行严格的设计并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作DNA重组技术或基因拼接技术。 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 实质 结果 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 基因工程的概念 人类需要的基因产物 基因重组 人耳老鼠 蓝玫瑰 夜光猫 荧光猪 基因工程培育抗虫棉的简要过程： 抗虫棉的培育有哪些关键步骤？ 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 普通棉花(无抗虫特性) 棉花细胞(含抗虫基因) 与运载体结合，导入 棉花植株(有抗虫特性) 表达 解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？ 基因工程培育抗虫棉的关键步骤： 关键步骤一： 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二： 抗虫基因与运载体结合 关键步骤三： 抗虫基因导入棉花细胞（受体） ——“分子手术刀” ——“分子缝合针” ——“分子运输车” DNA 重组技术的基本工具 本节知识内容 §1-1 DNA重组技术的基本工具 专题一 基因工程 “分子缝合针” ──DNA连接酶 “分子运输车” ──基因进入受体细胞的载体 “分子手术刀” ──限制性核酸内切酶 “分子缝合针” ──DNA连接酶 “分子运输车” ──基因进入受体细胞的载体 磷酸二酯键 主要是原核生物 4000种。 1、来源： 2、种类： 3、作用（部位）： 5、结果： 形成两种末端 一、“分子手术刀” ——限制性核酸内切酶 （限制酶） 黏性末端 平末端 4、特点： 特异性 A T G C A T G C 限制酶切割磷酸二酯键 1、大肠杆菌的一种限制酶（EcoRⅠ)能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开形成黏性末端。 2、SmaⅠ能识别CCCGGG序列，并在C和G之间切割形成平末端 。 常见的两种限制酶 SmaⅠ 平末端　　　平末端 　 EcoRⅠ 黏性末端　　　　 黏性末端 什么叫黏性末端？ 当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 什么叫平末端？ 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 基因的针线：DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同种限制酶切割