A2B腺苷受体通过调控DC细胞IL-6产生和Th17分化影响EAE发病介绍.doc

博士学位论文AdissertationsubmittedtoTongjiUniversityinconformitywiththerequirementsforthedegreeofDoctorofPhilosophyJune,2013学位论文版权使用授权书本人完全了解同济大学关于收集、保存、使用学位论文的规定，同意如下各项内容：按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存学位论文的印刷本和电子版，并采用影印、缩印、扫描、数字化或其它手段保存论文；学校有权提供目录检索以及提供本学位论文全文或者部分的阅览服务；学校有权按有关规定向国家有关部门或者机构送交论文的复印件和电子版；在不以赢利为目的的前提下，学校可以适当复制论文的部分或全部内容用于学术活动。学位论文作者签名：年月日同济大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师指导下，进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本学位论文的研究成果不包含任何他人创作的、已公开发表或者没有公开发表的作品的内容。对本论文所涉及的研究工作做出贡献的其他个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本学位论文原创性声明的法律责任由本人承担。学位论文作者签名：年月摘要多发性硬化症（Multiplesclerosis，MS）是一种由T细胞介导的，以免疫细胞引起中枢神经系统脱髓鞘和神经退行性病变为特征的自身免疫性疾病。实验性自身免疫性脑脊髓炎（Experimentalautoimmuneencephalomyelitis，EAE）是MS的动物模型，与MS在病理学上和组织学上有很多的相似性。G蛋白偶联受体（Gprotein–coupledreceptors，GPCRs）是一种七次跨膜受体，介导许多重要的生物学过程，是市场上最重要的药物靶点。许多GPCRs参与介导MS或EAE的发病进程。腺苷是一种重要的内源信号分子，通过激活腺苷家族四个G蛋白偶联受体A1AR、A2AAR、A2BAR和A3AR来发挥作用；四个腺苷受体在许多免疫细胞上有表达，调节天然免疫和获得性免疫反应。A2B腺苷受体是一个与腺苷低亲和性的受体，需要在特定疾病状态如局部缺血、炎症反应、创伤及其他外界压力所到达的腺苷浓度下才能被激活。A2B腺苷受体在MS发病中的作用目前还不是很清楚。在本项研究中，我们发现A2B腺苷受体在多发性硬化症病人外周血白细胞和实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠（EAE）外周淋巴组织中表达上调。A2B腺苷受体特异性拮抗剂CVT-6883和MRS-1754，都能够改善EAE小鼠临床症状，减轻免疫细胞对中枢神经系统的损伤。A2B腺苷受体敲除（A2BAR-KO）同样能够减轻EAE小鼠发病的严重程度。接下来的研究结果表明，抑制A2B腺苷受体或是该受体的基因敲除能够通过阻断抗原递呈细胞（APCs）如树突状细胞（DCs）白介素-6（IL-6）的生成，从而抑制Th17细胞的分化。在DC细胞中，A2B腺苷受体在EAE发病过程中表达也是上调的。CVT-6883和A2B腺苷受体基因敲除能够显著减少腺苷介导的IL-6产生。磷脂酶C（PLC）-蛋白酶C（PKC）和p38MAPK信号通路参与了A2B腺苷受体介导的IL-6产生。我们的发现不仅揭示了A2B腺苷受体在EAE发病中的致病作用，同时又预示该受体可能成为发展治疗MS药物新的作用靶点。关键词：多发性硬化，实验性自身免疫性脑脊髓炎，A2B腺苷受体，Th17分化，树突状细胞，白介素-6ABSTRACTMultiplesclerosis(MS)isaTcell–mediatedautoimmunediseasethatischaracterizedbyimmune-mediateddemyelinationandneurodegenerationoftheCNS.Experimentalautoimmuneencephalomyelitis(EAE)isananimalmodelthatsharesmanypathologicalandhistologicalsimilaritieswithMS.Gprotein–coupledreceptors(GPCRs),alsoknownasseven-transmembranereceptors,aremediatemanyimportantbiologicalprocessesandarethemostdruggabletargetsonthemarket.ManyGPCRshavebeenshowntomediatethepathogenesisofMSorEAE.AdenosineakeyendogenoussignalingmoleculeandelicitsitsactionsviafourGPCRs,de