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第2课时 基因工程的基本操作程序
目标导航 1.简述基因工程原理及基本操作程序。2.尝试设计某一转基因生物的研制过程。
一、基因工程的基本操作程序
1.____________的获取。
2.________________的构建。
3.将目的基因导入____________。
4.目的基因的________与鉴定。
二、目的基因的获取
1.目的基因:主要是指编码蛋白质的________,也可以是一些具有________________。
2.基因文库
(1)基因文库的含义:将含有某种生物不同基因的许多________,导入________的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。
eq \a\vs4\al(?2?基因文,库的种类)eq \b\lc\{\rc\ (\a\vs4\al\co1(基因组文库:含有一种生物的 基因,部分基因文库:含有一种生物的 基因))
3.获取目的基因的方法
(1)从基因文库中获取目的基因
eq \a\vs4\al(目的基因的,获取依据)eq \b\lc\{\rc\ (\a\vs4\al\co1(a.基因的 序列,b.基因的功能,c.基因在 上的位置,d.基因的 产物mRNA,e.基因的 产物蛋白质))
(2)利用PCR技术扩增目的基因
①PCR的含义:是一项在生物体外________特定DNA片段的核酸合成技术。
②过程:目的基因受热形成__________,与________结合,在________的作用下延伸形成DNA。
③方式:指数扩增=2n(n为扩增循环的次数)。
(3)人工合成法:若________较小,________序列已知,可以人工合成。
三、基因表达载体的构建
1.组成eq \b\lc\{\rc\ (\a\vs4\al\co1( ,启动子\b\lc\{\rc\ (\a\vs4\al\co1(位置:基因的 ,功能:是 识别和结合的部位,, 驱动基因转录出 )), \b\lc\{\rc\ (\a\vs4\al\co1(位置:基因的 ,功能:终止 )),标记基因: 受体细胞中是否含有 ))
2.功能:(1)使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以________给下一代;
(2)使目的基因________和发挥作用。
四、将目的基因导入受体细胞
1.转化:______________进入受体细胞内,并且在受体细胞内____________和______的过程。
2.导入植物细胞
(1)方法:________________、基因枪法、________________。
(2)农杆菌特点
①易感染____________和____________。
②Ti质粒上的________可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞____________上。
3.导入动物细胞
(1)常用方法:____________技术。
(2)常用受体细胞:________。
4.导入微生物细胞
(1)原核生物特点:________、多为________、遗传物质相对________等。
(2)对受体细胞的常用处理方法:用______处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(这种细胞称为________________)。
五、目的基因的检测与鉴定
1.eq \a\vs4\al(分子水平,上的检测,与鉴定)eq \b\lc\{\rc\ (\a\vs4\al\co1(\a\vs4\al( , 技术)\b\lc\{\rc\ (\a\vs4\al\co1(①检测转基因生物的 上的目, 的基因,②检测目的基因是否转录 )),抗原—抗体杂交技术:用于检测目的基因是否, 翻译 ))
2.个体生物学水平上的检测与鉴定:
如一个抗虫或抗病的目的基因导入植物细胞后,是否赋予了植物抗虫或抗病特性,需要做抗虫或抗病的____________。
知识点一 目的基因获取的几种方法
1.有关目的基因的获取和基因文库的理解,不正确的是 ( )
A.目的基因可以从自然界中分离,也可以人工合成
B.目的基因主要指编码蛋白质的结构基因
C.基因文库就是基因组文库
D.cDNA文库只含有某种生物的一部分基因
2.下列属于PCR技术所需条件的是 ( )
①单链的核苷酸序列引物 ②目的基因所在的DNA片段③脱氧核苷酸 ④核糖核苷酸 ⑤DNA连接酶 ⑥DNA聚合酶 ⑦DNA限制酶
A.①②③⑤ B.①②③⑥
C.①②③⑤⑦ D.①②④⑤⑦
知识点二 基因表达载体的构建和目的基因的导入
3.在用基因工程技术构
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