仪器分析课件5.5 应用.ppt

第五章毛细管电泳 5.5.1 离子化合物的分析 5.5.2 在生物化学中的应用 5.5.3 在手性化合物分离中的应用 5.5.1 离子化合物的分析 2.阴离子分析 5.5.2 在生物化学中的应用 氨基酸与蛋白质分析 蛋白质分析 核酸分析及DNA测序 5.5.3 手性化合物分析 手性化合物分析 手性化合物分析 新进展 请选择内容 第五节高效毛细管电泳的应用 capillary electrophoresis, CE Application of HPCE 1.阳离子分析 迁移方向和电渗流方向一致； 4.5 min内分离了24种金属离子； 阳极进样，阴极检测； 具有很高的灵敏度。 阴离子电泳方向和电渗流方向相反、速率接近，分析时间长、效率低。 质量小、电荷密度大的离子如：SO42-，Cl-，F-等，电泳速率大于电渗流，阳极端流出，在阴极端无法检测。 加入电渗流改性剂，十六烷基三甲基溴化胺等，使电泳方向和电渗流方向一致，可在3.1 min内分离36种阴离子。 阴极进样，阳极检测。 检测体液或细胞中某些代谢产物的分析。 尿液中的氨基酸含量作为临床诊断糖尿病的辅助手段。 采用毛细管区带电泳方式，在11min内分离17种药物。 采用MEKC模式，鉴定违禁药物，效果优于HPLC法。 采用MEKC模式，在25min内分离了23种丹酰化氨基酸； HPCE可取代传统的氨基酸分析仪。 问题：吸附和检测。 重要分析手段。 图为酶解的双螺旋DNA限制性片段的分离。 合成获得单一手性化合物相当困难。在528种手性合成药物中，61种以单一对映体形式销售，其他为外消旋体。检测分析也相当困难。研究热点。 R- 型反应停是安眠药，S-型致胎儿畸形。 HPCE分离分析手性化合物的方法：加入手性选择剂， 形成配合物的稳定常数有差异，结合HPCE的高效率。 常用手性选择剂：环糊精及其衍生物，手性冠醚，手性表面活性剂（氨基酸衍生物，胆酸钠，牛磺脱氧胆酸及其钠盐，低聚糖等天然手性表面活性剂）。 利用手性冠醚的CZE模式分离 利用手性胶束的MEKC模式分离 Regan等利用CE研究了生物技术制备BCH-189（抗爱滋病药物）过程中的某些反应，如其中的有效成分（+）-BCH-189是在胞苷脱氨酶催化下经生物转化方法合成的，转化过程持续51h，可采用CE法分析监测转化过程中手性对映体转化（分离的手性选择试剂为二甲基-β-CD）。 对映异构体随时间转化过程的HPCE分析监测谱图 （1）微型化 整体化学分析系统（TAS）及TAS微型化 在硅片上光刻出矩形槽作为毛细管，理论塔板数105/m。 （2）联用仪器 CE-MS。 （3）阵列毛细管凝胶电泳 应用于人类基因DNA测序； 5～10万个基因，30亿个碱基对，目前最有效的DNA序列分析仪，10h/次；可同时电泳24个试样；速度1200碱基对/h，提高速度！ 100支毛细管阵列电泳；速度280碱基对/(h·支)。 结束 ? 第六章 5.1 毛细管电泳的基本原理 5.2 高效毛细管电泳仪 5.3 毛细管电泳的分离模式 5.4 影响分辨率的因素及操作条件选择 5.5 高效毛细管电泳的应用 * *