【分析化学】吸光光度法.ppt

* 吸收光谱的特点 A: Absorption (吸光度) 最大吸光度所对应的波长为最大吸收波长。是与分子性质有关的重要参数, 与浓度无关。 吸收光谱的形状是物质特有性质，与浓度无关 —定性分析基础 吸光度的强度与物质的浓度成正比 —定量分析基础 波长/nm A C * 3.仪器和测量背景的扣除——参比(空白)溶液 溶剂参比：若仅待测组分与显色剂反应产物在测定波长处有吸收，其它所加试剂均无吸收，用纯溶剂（水)作参比溶液； 试剂参比：若显色剂或其它所加试剂在测定波长处略有吸收，而试液本身无吸收，或试剂和溶剂中容易存在被测物质，用“试剂空白”(不加试样溶液)作参比溶液； 试液参比：若待测试液在测定波长处有吸收，而显色剂等无吸收，则可用“试样空白”(不加显色剂)作参比溶液； 为什么需要使用参比(空白）溶液？ 测得的的吸光度真正反映待测溶液吸光强度。 参比溶液的类型和选择： * 10.3 吸光光度分析及误差控制 吸光光度分析包括定性分析和定量分析 定性分析：扫描吸收光谱，确定最大吸收波长 定量分析：根据朗伯比尔定律进行 * 1. 测定波长的选择和标准曲线的测定 (1) 选择适当的入射波长 一般应该选择λmax为入射光波长。但如果λmax处有共存组分干扰时，则应考虑选择灵敏度稍低但能避免干扰的入射光波长。 A ?/nm a b ?max ?’ 吸光度具有加和性，同一波长下有吸收的化合物互相干扰 选择原则：“吸收最大，干扰最小” 灵敏度 选择性 * (2). 标准曲线法——定量分析方法 配制一系列标准溶液, 分别测量溶液的吸光度, 以浓度为横坐标, 吸光度为纵坐标, 绘制的曲线称为标准曲线, 为一通过原点的直线. C A 0 Cx Ax 测量未知液的吸光度, 可以从标准曲线上查出未知液的浓度. 标准曲线法较为准确, 简单, 易于计算和掌握, 是各种仪器分析常用的定量分析方法. 线性方程（一元回归方程，P69） 线性相关系数 r?1.0 * 2. 对lambert-Beer定律的偏离 偏离朗伯－比尔定律现象 由于物理和化学等因素使标准曲线偏离了直线。 (1) 单色光不纯 (2) 溶液介质不均匀 (3) 化学因素 * 根据Lambert－Beer定律，入射光应是单色光 单色光不纯 * 溶液介质不均匀，有胶体粒子或悬浮物存在，将发生光的散射，使测定的A增大，产生正偏离。 I0 I 溶液介质不均匀 * * 溶液中存在着离解、聚合、互变异构、配合物的形成等化学平衡时。使吸光溶质的浓度甚至结构发生变化，影响吸光度，有时使最大吸收波长发生改变。 例： 铬酸盐或重铬酸盐溶液中存在下列平衡： CrＯ42- ＋2H＋ = Cr2Ｏ72- ＋H2Ｏ 溶液中CrＯ42-、 Cr2Ｏ72-的颜色不同，吸光性质也不相同。 化学性因素 * 3. 吸光度测量的误差 主要误差来源 偏离朗伯比尔定律 —— 仪器和化学以及物理的因素 吸光度测量 —— 仪器误差 * 吸光度测量的误差 吸光度与透光度是对数关系 A = -lgT = ?bc A 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 T% 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 1.0 1.5 ? 吸光度的测量误差等于读数误差和吸光度之比 * A = ?bc dA = ?bdc 两式相比 测量误差与浓度误差成正比 由于 A＝－lgT＝－0.434lnT 两式相比 多数仪器测量透光度可准确到小数点后第二位，?T＝? 0.01 测量误差 * T=0.368 时读数误差最小, 相应的吸光度 A=0.434.因此想使测量误差较小，吸光度读数范围应在0.2-0.8之间。 测量误差与T的关系 Er% T 0.368 稀释 浓缩 选择合适的比色皿 * 1. 2. 最小误差的A＝0.434 则 倍 3． 比色皿2cm 吸光度A ＝2 比色皿1cm 吸光度A ＝1 比色皿0.5cm 吸光度A ＝0.5 T = 10-0.5 = 0.316 例10-3 某一有色溶液在2.0cm吸收池中，测得百分透光率T％＝1，若仪器透光度绝对误差为0.5, 计算：1．测定的浓度的相对误差。 2．为使测定吸光度在最适读数范围内，溶液应稀释或浓缩多少倍？3．若浓度不改变，而改变比色皿厚度，则应选用哪种厚度的比色皿最合适？此时浓度误差为多少？ * 2 在吸光光度法中，应将吸光度值控制在（ ）的范围之内，以使测量的准确度较高。 课堂练习 1某物质的摩