第十三章 蛋白质生物合成.pptVIP

第十三章 蛋白质的生物合成 第一节 蛋白质合成体系的重要组分 第二节 蛋白质的合成过程 第一节 蛋白质合成体系的重要组分 翻译（translation）：在蛋白质合成期间，将存在于mRNA上代表一个多肽的核苷酸残基序列转换为多肽链氨基酸残基序列的过程。 蛋白质生物合成体系的重要组分主要包括mRNA 、tRNA 、rRNA、有关的酶以及几十种蛋白质因子。其中，mRNA是蛋白质生物合成的直接模板。 蛋白质合成的场所是核糖体，原料是20种L-氨基酸，反应所需能量由ATP、GTP提供，此外还有Mg2+、K+ 等金属离子参与。 无细胞蛋白质合成系统（P509） Nirenberg 等将大肠杆菌破碎，离心除去细胞碎片，上清液含有蛋白质合成的所需各种成分，其中包括DNA、mRNA、tRNA、核糖体、氨酰tRNA合成酶以及蛋白质合成必需的各种因子。 将上清液保温一段时间，内源mRNA被降解，该系统自身蛋白质的合成即停止。 当补充外源nRNA以及ATP、GTP和氨基酸等成分，再在37℃保温就能重新合成新的蛋白质。 遗传密码的特点 （1）密码子的方向性 密码子的阅读方向及它们在mRNA由起始信号到终止信号的排列方向均为5?-3’，与mRNA链合成时延伸方向相同。 （2）密码子的简并性（ degenerate codon ） 64-3=61个代表20种氨基酸，仅甲硫氨酸、色氨酸只有一个密码子。一个氨基酸可以有几个不同的密码子，编码同一个氨基酸的一组密码子称为同义密码子。这种现象称为密码子的简并性。 （3）密码子的连续性（读码）（无标点、无重叠） 从正确起点开始至终止信号，密码子的排列是连续的。既不存在间隔（无标点），也无重叠。在mRNA分子上插入或删去一个碱基，会使该点以后的读码发生错误，称为移码，由这种情况引起的突变称为移码突变。 （4）密码子的基本通用性（近于完全通用） 对于高等、低等生物都适用，只有一个例外：真核生物线粒体DNA。 一些原核生物中利用终止密码翻译氨基酸（UGA-Trp\硒代半胱氨酸） （5）起始密码子（ iniation codon ）和终止密码子（ termination codon ） 64种密码子中，AUG为甲硫氨酸的密码子，又是肽链合成的起始密码子。缬氨酸的密码子(GUG)(极少出现）。 UAA，UAG，UGA为终止密码子，不编码任何氨基酸，而成为肽链合成的终止部位（无义密码子）。 二、tRNA 在蛋白质合成中，起着运载氨基酸的作用，按照mRNA链上的密码子所决定的氨基酸顺序将氨基酸转运到核糖体的特定部位。 同工受体tRNA:一种氨基酸可以有一种以上tRNA作为运载工具。把携带相同氨基酸而反密码子不同的一组tRNA称为同工受体tRNA。 反密码子（anticodon）：tRNA分子的反密码子 环上的三联体核苷酸残基序列。在翻译期间，反密码子与mRNA中的互补密码子结合。 氨酰-tRNA合成酶（aminoacyl-tRNA synthetase）：催化特定氨基酸激活并共价结合在相应的tRNA分子3ˊ端的酶。 氨酰-tRNA（aminoacyl-tRNA）：在氨基酸臂的3ˊ端的腺苷酸残基共价连接了氨基酸的tRNA分子。 三、rRNA及核糖体 核糖体是由几十种蛋白质和几种rRNA组成的亚细胞颗粒，其中蛋白质与rRNA的重量比约为1:2。核糖体是蛋白质合成的场所。 核糖体的存在形态有三种：单核糖体、核糖体亚 基和多核糖体。 第二节 蛋白质的合成过程 它需要核糖体30S和50S亚基、带有起始密码子AUG的mRNA、fMet-tRNAf 、起始因子IF1、IF2、IF3（分子量分别为10 000、80 000和21 000的蛋白质）以及GTP和Mg2+的参加。 肽链合成的延伸需要70S起始复合物、氨酰-tRNA、三种延伸因子：一种是热不稳定的EF-Tu，另一种是热稳定的EF-Ts，第三种是依赖GTP的EF-G以及GTP和Mg2+。 肽链合成的终止和释放需要三个终止因子RF1、RF2、RF3蛋白的参与。 tRNA与多肽合成的有关位点 3’端-CCA上AA接受位点 识别氨酰-tRNA合成酶位点 核糖体识别位点 反密码子位点（识别mRNA上的密码子） 在肽链合成起始时，首先是核糖体小亚基与mRNA上的核糖体结合位点识别结合，然后，大亚基与小亚基结合，形成完整的核糖体（70S起始复合物）。 70S复合物的形成： EF-Tu-GDP+ EF-Ts EF-Tu-Ts + GDP EF-Tu-Ts + GTP EF-Tu-GTP + EF-Ts 嘌呤霉素（puromycin）：通