2014-2015学年高中生物（人教版）精品课件系列：选修3专题1第2节基因工程的基本操作程序.pptVIP

2.利用PCR技术扩增目的基因 称多聚酶链式反应 穆里斯等人于1988年发明的。 PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。 1.下列有关PCR过程的叙述中不正确的是（ ） A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现 B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成 C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸 D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高 位于基因的首端的一段特殊的DNA片断，是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得蛋白质，但启动子本身不被转录 三、将目的基因导入受体细胞 目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化。 2、将目的基因导入动物细胞 （1）方法：显微注射技术 （2）程序： 2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白“的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是 A．追踪目的基因在细胞内的复制过程 B．追踪目的基因插入到染色体上的位置 C. 追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布 D．追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构。 继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答： （1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是____________________。 （2）进行基因转移时，通常要将外源基因转入__________中，原因______________________ （3）通常采用____________________技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。 （4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的__________细胞中特异表达。 能发光的水母 能否让热带鱼也能发光? 设想 不能发光的热带斑马鱼  1.2 基因工程的基本操作程序  能够发光的热带鱼 一：目的基因的获取 获取目的基因是实施基因工程的第一步 。 目的基因主要是指能编码蛋白质的基因。例如：与生物抗逆性相关的基因、与优良品质相关的基因等。 获取目的基因的方法： 1.从基因文库中提取 基因组文库 部分基因文库 2.利用PCR技术扩增 3.化学方法人工合成 如何从基因文库中得到所需要的基因？ 依据：目的基因的有关信息 如：根据基因的核苷酸序列 基因的功能 基因在染色体上的位置 基因的转录产物mRNA 基因翻译产物蛋白质等特性 ① 概念：PCR全称为_______________，是一项 在生物____复制___________的核酸合成技术 ③条件：_______________________、 _______________、___________ 、 ___________. ②原理：__________ ④方式：以_____方式扩增，即____（n为扩增循环的次数） 多聚酶链式反应 体外 特定DNA片段 已知基因的核苷酸序列 四种脱氧核苷酸 引物 DNA聚合酶 指数 2n DNA复制 在TaqDNA聚合酶的作用下，以四种脱氧核苷酸为原料，进行延伸，合成与模板互补的DNA链 。 ⑤反应过程： a.变性(90～95℃): b.复性（退火）(55～60℃): c.延伸(70～75℃): DNA模板解链 引物与模板结合，形成局部双链 d.多次重复 PCR技术与体内DNA复制的区别： 1. PCR不需要解旋酶；体内DNA复制需要； 2. PCR需要耐热的DNA聚合酶（常TaqDNA聚合酶），而生物体内的聚合酶在高温时会变性； 3. PCR一般要经历三十多次循环，而生物体内DNA复制受生物体遗传物质的控制。 4.PCR不需要ATP,体内DNA复制需要； C 3.PCR技术扩增DNA,需要的条件是（ ） ①目的基因 ②引物 ③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等 ⑤mRNA ⑥核糖体 A、①②③④　　 　　B、②③④⑤　 C、①③④⑤　　 D、①②③⑥ A 2.获取目的基因的方法有多种，下列 不属于目的基因获取方法的是（ ） A、从基因组文