磷酸化硕士剖析.pptVIP

结构与功能 2个调节亚基（R）+2个催化亚基（C）→APK全酶复合体（R2C2）（无cAMP时，无活性） cAMP与特异R亚基结合→构象变化→ R亚基二聚体+2个有活性C亚基,各种哺乳动物细胞于不同水平表达3种C亚基亚型(CαCβCγ)和4种R亚基亚型(RⅠ α RⅠ β RⅡ α RⅡ β) →结合成全酶APK Ⅰ型和 Ⅱ型.不同R亚基亚型主要区别: RⅠ―Mg2+/ATP高亲和位点 RⅡ―自身磷酸化 细胞分布与移位RⅠ亚型主要位于胞浆、神经组织中，RⅡ亚型分布于浆膜、细胞骨架成分、树突、分泌颗粒和核膜，是R Ⅱ作用于特定的锚定蛋白所致底物多巴胺和cAMP调节的磷蛋白（dopamine and adenosine-3, 5-monophosphate regulated phosphoprotein DARPP-32）是PKA的有效底物，存在于具有D1多巴胺受体的神经细胞胞浆中。 2、与蛋白激酶辅助因子竞争的抑制剂 （1）PCK抑制剂 Calphostins：是作用于PCK的的DAG结合位点的抑制剂 鞘氨醇 能与Cu2＋， PS和DAG竞争抑制PCK，也是CaM的拮抗剂 （2）CaM依赖性蛋白磷酸抑制剂 甲状腺素：能与CaM竞争MCLK结合而抑制其活性 异喹啉衍生物KN-62: CaM K II 抑制剂（较为特异的） （3）与蛋白/肽底物竞争抑制剂 Walsh：是较为特异的APK抑制剂。同肽底物竞争 （三）蛋白磷酸酯酶（protein phosphatase 。） 70年代末PTPase活性首次被发现，已知对Ser/Thr激酶的磷酸酯酶有PP1,PP2A,PP2B,PP2C,PPx等分布涉及各组织以至细胞器，定位各有有侧重，均有亚型 PP1(位于胞浆为为PP11 糖原分子为PP1G,位于肌丝为PP1M,核为PP1N) PP2A主要存在胞浆，少数在线粒体和核 PP2B与膜连接有关（调节亚单位 氨基末端甘氨酸残基豆蔻化） PP2C只要存在于胞浆 PPC存在于细胞膜 PPx存在于线粒体 * 蛋白质磷酸化与非磷酸化 非活性蛋白与活性蛋白的构象之间的转换是通过可逆共价修饰调节蛋白质的方式，蛋白激酶则是这一过程催化磷酸化的重要蛋白，而磷酸酯酶是去磷酸化的重要蛋白. 已经发现在人体内有多达2000个左右的蛋白质激酶和1000个左右的蛋白质磷酸酶基因。蛋白质的磷酸化是指由蛋白质激酶催化的把ATP或GTP上γ位的磷酸基转移到底物蛋白质氨基酸残基上的过程，其逆转过程是由蛋白质磷酸酶催化的，称为蛋白质脱磷酸. 根据是否有调节物来分又可分成两大类：? 信使依赖性蛋白质激酶（messenger-dependent protein kinase），包括胞内第二信使或调节因子依赖性蛋白激酶及激素（生长因子）依赖性激酶两个亚类；非信使依赖型蛋白激酶。 蛋白激酶的催化作用： 　使调节酶磷酸化 (1)磷酸化酶激酶—P—激活 (2)糖原合成酶—P—失活 使许多蛋白质磷酸化 (1)核中组蛋白磷酸化—加速核酸的复制，转录。 　 (2)核糖体蛋白质磷酸化—加速蛋白质合成通性。 　 (3)使膜蛋白磷酸化—加速物质的转运。 蛋白质磷酸化在细胞信号转导中的作用 (1). 在胞内介导胞外信号时具有专一应答特点。与信号传递有关的蛋白激酶类主要受控于 胞内信使，如cAMP，Ca2+，DG（二酰甘油，diacyl glycerol）等，这种共价修饰调节方式显然比变构调节较少受胞内代谢产物的影响。 (2).蛋白质的磷酸化与脱磷酸化控制了细胞内已有的酶活性。与酶的重新合成及分解相比，这种方式能对外界刺激做出更迅速的反应。(3).对外界信号具有级联放大作用；(4).蛋白质的磷酸化与脱磷酸化保证了细胞对外界信号的持续反应。 被磷酸化的主要氨基酸残基：丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸。组氨酸和赖氨酸残基也可能被磷酸化。 1、Ser/Thr蛋白激酶 蛋白磷酸化是蛋白激酶将磷酸基因转移到特定底物蛋白上的共价修饰过程，调控蛋白质的酶学活性或生物学功能。分为: ①cAMP依赖的PK ②Ca2+/磷脂依赖的PK ③ Ca2+/