第二红细胞血型检测剖析.pptVIP

三、不规则抗体的鉴定 抗体筛选试验用的试剂筛选红细胞，通常是2或3个人份的 O型红细胞成为一套试剂，每套试剂筛选红细胞中至少有 以下常见的抗原：D、C、E、c、e、M、N，条件不足的实 验室不一定具备Lua、V、Cw、Kpa、Jsa 类的抗原。 一旦抗体被检出，应作抗体鉴定试验，以确定其特异性。 抗体鉴定实验包含以下主要内容： (1)自身细胞检查：观察患者(受者)的血清与患者(受者) 自身细胞的反应情况，确定血清内是否有自身抗体或自身 抗体和同种抗体二者同时存在。 (2)谱红细胞：使用试剂细胞中的谱细胞，应用各种抗体 检查技术，检测患者的血清，确定其抗体的特异性。 抗体鉴定试验结果的解释及处理： 1.与谱细胞反应明显，确定为单一抗体或无法确定为单一抗体，应加以鉴别。 2.与谱细胞呈弱反应，结果不明确 （1）分析结果： ① 是否符合剂量效应 ② 是否有某些个体差异抗原的抗体 ?谱细胞是否新鲜 （2）改变试验方法:①使用高灵敏度的方法重复试验 ②添加试剂后重复实验③带抗体增强后重复试验④适当增加血清与红细胞比例，适当增加孵育时间 3.与所有谱细胞反应，自身细胞阴性 （1）强度不一致：可能存在混合抗体 （2）强度一致： ?抗体可能为专于O细胞反应的抗体（如：抗-I、抗-H、抗-HI） ?可能针对高频抗原的抗体 ?可能针对谱细胞的抗体 4.与所有谱细胞反应，自身细胞阳性 （1）存在自身抗体 （2）同种和自身抗体同时存在 （3）冷凝集：在冷凝集素的作用下存在凝集红细胞 （4）假凝剂：在干扰因子的作用下一可造成红细胞假凝集 （5）酶引起的多凝集 （6）补体的影响 5.与谱细胞不反应，自身细胞阳性 可能是自身抗体或C?阳性 五 不规则抗体鉴定时遇见的的问题 1.不规则抗体筛查阴性，输血后发现溶血 （1）交叉配血假阴性 （2）抗球蛋白试验不规则抗体筛查假阴性 ?试剂保存不当?洗涤不充分?实验操作④红细胞浓度过高造成凝集减弱或红细胞浓度过低造成凝集不易被观察到 2.不规则抗体筛查阳性，抗体特异性难以鉴定 （1）抗体筛查假阳性：①离心不当②试管污染③硅胶管引起的凝集 （2）谱细胞单一：应采用3个以上不同供应商的谱细胞系，排查抗体的特异性。 四、抗体筛查和鉴定的影响因素 1.抗体筛查和鉴定细胞的质量 ?筛查细胞不包括低频率抗原，不能检出低频率抗原。 ?谱细胞：用于抗体鉴定的试剂红细胞。 ?在选择不规则抗体筛查或鉴定细胞时，应符合本地区不规则抗体分布的特点。 2.试验方法 IgM抗体在4℃，凝集强度明显大于室温，37℃会有减弱 3.抗体的特异性 ?抗体筛查试验为阴性，并不意味着被检血清中一定没有抗体 ?筛查细胞漏检ABO亚型抗体（如抗-A?） 四、交叉配血试验 （一）要求和内容 交叉配血的要求： 主侧配血要求： 绝对不可以有凝集或溶血现象。 次测配血要求： 供血者血清加受血者红细胞在允许范围内，可以有凝集现象，但不可以有溶血。 凝集 不凝集 交叉配血试验的内容 患者 献血者 主侧 次侧 主侧配血 用患者血清与供 者红细胞进行试验 次测配血 供血者血清与患 者红细胞进行试验 交叉配血的目的 交叉配血试验是输血前必要的步骤，主要是检查受血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体。主要目的是为了防止输血后产生溶血性反应。 尽可能确保对人和一个病人来说，输了供血者的血不会引起有害反应，并且使红细胞在输注后能保持最长的存活时间。 （二）结果的解释及处理 1.抗体筛查阴性，交叉配血相容： 绝大部分标本抗体筛查阴性，交叉配血也是相容的。 2.抗体筛查阴性，主侧交叉配合试验阳性 （1）复查血型 （2）主侧凝集类B抗原 （3）血清中可能含有一种ABO抗体，必要时可以做ABO亚型鉴定 （4）受血者血清中含有同种抗体 3.抗体筛查试验阳性，主侧交叉配合试验阳性 （1）自身对照试验阴性：受血者体内有同种不规则抗体。 （2）自身对照试验阳性：受血者血清内可能有自身抗体或同时存在不规则抗体。 （三）影响因素 ①离子干扰 ②温度 ③操作不规范 ④ 离心不当 第二节 盐水介质实验技术 盐水介质试验技术常用于血型鉴定、血清中IgM类抗体的筛查和鉴定、盐水介质的交叉配血等。 基本方法 1.平板法 用于ABO血型和RhD抗原的定型 特点：简单、快速，但易污染环境。 2.试管法 为定型试验方法，也可于半定量试验。 是输血前检验最常用的试验方法。 特点：简单、快速、易学，结果准确、可靠。