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离子电导显微镜(Scanning ion conductive microscope, SICM) Contents 01 02 03 Introduction Principles of operation and instrumentation Attributes of SICM 1、Introduction 1989年,Hansma等在扫描隧道显微镜的基础上,设计出了第一台SICM。 1997年,Korchev等利用交流式负反馈技术取代传统直流式负反馈技术,使SICM成功实现了对活体生物样品的高分辨率扫描成像。 2009年,Novak及其同事对SICM的连续负反馈模式再一次进行了改进,研究出了全新的跳跃模式。 Component: 2、Principles of operation and instrumentation SICM系统最关键的技术是探针与样品之间距离的精 确控制 2.1 Nonmodulated Mode 在直流模式下,为了避免探针与样品接触,通常不能将两者的距离设定得很近,而只能选择相对安全的距离,但是这样就牺牲了反馈系统的灵敏性,使反馈系统很容易受到非距离因素的干扰,如电压波动、溶液浓度不均匀和探针部分堵塞等,从而导致图像不清晰。 2.2 Distance-Modulated Mode 与直流电流的变化趋势相反,调制电流随探针与样品距离的减小而急剧增大,并且只与距离的变化有关。 2.3 Hopping Mode 当探针远离样品时测定参比电流,然后探针逼近样品表面,直到电流减小了参比电流的0.25%~1%,将此时探针在Z方向的位置记录为这一位点的样品高度。随后,探针抬起,当样品水平地移动到下一个成像位点后探针重新向样品表面逼近,如此重复,以完成扫描。 与连续模式相比,跳跃模式可以扫描起伏更大的表面 跳跃模式还可以通过实时改变成像像素的方式提高扫描速度 3.1 High spatial resolution 3、Attributes of SICM 分辨率取决于毛细管管径大小和样品-管距离; 通常垂直分辨率~10 nm,水平分辨率~50 nm。最高分辨率达到 3–6 nm Fi g a : SEM image of fixed A6 cel ls; b: SICM image of living A6 cells (左侧虚线箭头为微绒毛结构 , 右侧实线箭头为紧密连接) 3.2 Noncontact Surface Imaging Fig:Extensions of a fixed fibroblast 3.3 ISME-SICM 3.4 Imaging of CCPs(网格蛋白小窝) by combined SICM and confocal microscopy Thanks!
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