糖尿病的细胞替代治疗绪论.pptVIP

1.cell therapy for T1DM 2.pancreatic stem cell 胰岛分离后，胰腺仍保持相应消化功能 在体外研究中，收集新胰岛细胞能发现其从胰导管上皮生芽的现象。 可能存在胰岛细胞来源不清的问题 CK19+(green) insulin+(red) EP Cells Lack Tumorigenicity and Form Endodermal Tissues In Vivo 4.CB-SC -cord blood-derived multipotent stem cells 20000多例CBT，100多个脐血库中储藏了400000脐血单位。（Bone Marrow Donors Worldwide (BMDW), January 2009）提示资源丰富 治疗自身免疫性糖尿病新理念 top priority：control of autoimmunity subordinate : reconstruction of functional islets 成瘤性的减弱 美食当道，量力而行 thank you! * * 一型糖尿病胰岛病理特征：这些小岛大小是高度可变的,主要是小,但有时非常大。一些结构紧凑(图8);多数由纤维间质细索(图9)或不同直径的毛细血管分隔(图10)。 有关细胞治疗由几个环节需要解决：分别是1.想法，于是，在1972年，雷思博士首次在实验鼠上成功完成了胰岛移植，治愈了老鼠的糖尿病。1989年，雷思博士和同事大卫·夏朴博士完成了人类胰岛移植，使病人摆脱了胰岛素注射。2.胰岛的分离纯化 2002年，迈阿密的ricirdi教授发明了自动消化胰腺，收集胰岛细胞的循环设备，极大地提高了分离胰岛细胞的数量和质量。3.免疫抑制方案 2000年，加拿大的Shapiro等人改良了胰岛移植后免疫抑制方案，即取消了糖皮质激素和减少钙离子通道阻滞剂的新方案（西罗莫司，低剂量他克莫司和达克珠单抗），增加抑制胰岛细胞数量，结果让人鼓舞。共7例患者一年后全部脱离了对外源胰岛素的依赖。最后一个问题，也是今天要说的就是来源。 由于胚胎干细胞摆明了的伦理问题，所以我们就直接从成体干细胞聊起。关于胰腺干细胞，广泛来说是指所有来自胰腺的干细胞，但细化来讲，总体指的是具分化潜能的胰管细胞。有研究[10]证实胰腺导管细胞具有分化增值为胰岛细胞的潜能， 胰岛分离后，胰腺仍保持相应消化功能。在体外研究中，收集新胰岛细胞能发现其从胰导管上皮生芽的现象。但这一实验可能存在胰岛细胞来源不清的问题，即不能完全证明其来源于胰导管细胞， 图示的是基本实验步骤，在胰岛隔离后去人胰岛一处的胰腺组织，分离成单个细胞，将细胞分选为两组，一组是天然导管组，一组经CA19-9抗体免疫磁珠分选纯化，进入阶段A(开始细胞starting cells)，然后以单层细胞的状态扩增一周进入阶段B(扩增后细胞)，在疏水板上进行聚合，进入阶段C(aggregates),移植入非肥胖糖尿病/重症联合免疫缺陷小鼠，进入阶段D ()，成为移植物。 这张图是免疫组化图，绿染的是CK19+细胞，胰岛素阳性细胞红染。A:在新鲜分选的导管细胞中,没有胰岛素阳性细胞被认为,大多数细胞CK19阳性。 B.D.F:在纯化导管细胞0.1%基质样品,胰岛素阳性细胞在聚集团块中少见（B）。只有700个聚集团块（7000个细胞）中的7个中有单个的胰岛素阳性细胞a single insulin+ cell。所有这些移植物中的胰岛素阳性细胞(D和F)都嵌入于CK19阳性的管样结构中。 C.E：基质细胞 G:在自然管道细胞增殖过程中加入胰岛，那么胰岛素阳性细胞即与管样结构分隔较远。这一结果显示，　　同时也显示。但是组织干细胞存在老化凋亡的问题，如果通过抑制端粒酶来解决这一问题，细胞增殖变得不可调控，那么又成了一大难题。 运用EP细胞成功得到了分泌胰岛素的细胞，，通过免疫组化进行验证，，红色标记了C肽，绿色标记了GCG (green) or PDX1 (green),DAPI用于活细胞定位和固定染色。Pdx1 (Pancreatic and duodenal homeobox 1)胰岛β-细胞成熟的重要因子，图中，将细胞培养第12天和第18天的细胞与正常胰岛细胞进行比对，我们可以看到， 给小鼠分别注射胚胎干细胞和内胚层干细胞，结果显示几乎所有ESC组小鼠都伴发肿瘤，而EPC组则没有，原文中还进行了相关免疫组化和病理切片，这里我就不在赘述了，作者并未详细阐明机制。 自从第一次脐带血移植（CBT）后，全球共报道了20000多例CBT，同时在100多个脐血库中储藏了400000脐血单位。（来源：Bone Marrow Donors Worl