关于全国竞赛有参考价值的实验.docVIP

??????? 生化实验内容1、 pET3a-RecA质粒电泳2、 牛奶中的蛋白3、?? 酵母糖酵解实验4、?? 滤纸崩溃法测定纤维素酶活力5、?? PCR实验—性别鉴定6、?? 微生物的分离技术pET3a-RecA质粒电泳实验目的 比较质粒载体、重组质粒电泳时的迁移速度。实验用具 锥形瓶，电泳仪，电泳槽，微波炉，微量可调移液器，DNA电泳图谱观察仪 实验用具 实验步骤 1．取出0.4g琼脂糖，倒入100ml的锥形瓶中，加入50ml 1x TAE缓冲液，摇匀，用封口膜将瓶口封住，放在微波炉内，至琼脂糖完全溶解。室温冷却至60左右；2. 在水平操作台上，将胶槽放好，插入样品槽梳子，倒入60的凝胶。待凝胶冷却后，拔出样品槽梳子，将凝胶连同胶槽一起放入电泳槽。加入1x TAE缓冲液，缓冲液漫过胶块即可；3. 将重组质粒、质粒载体中分别各加入2ul染色液和2μl加样缓冲液，将离心管放在振荡器上混均，再用20μl的微量移液器分别取重组质粒20μl、质粒载体20μl，缓慢加入凝胶上样孔；4. 加样完毕，盖上电泳槽，接好电源，调节电压至100V，开始电泳，当样品中溴酚蓝条带移动到凝胶前沿即可停止电泳；5. 观察电泳结果：电泳结束后，将电泳槽移至DNA图谱观察仪中，打开光源，在观察窗上观看电泳结果；6．记录：将观察结果依比例划在图1中。质粒电泳图谱，1为质粒载