ELISA原理剖析.pptVIP

封闭 封闭(blocking)是继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙，从而排斥ELISA后的步骤中干扰物质的再吸附。 常用封闭剂：0.05%-0.5%的BSA; 10%的小牛血清或1%明胶;脱脂奶粉,比较价廉，可以高浓度使用（5%）。 所有的ELISA固相均需封闭。 空白值：不加样品时所测的数据。 ELISA ELISA 的发展历程 ELISA 的原理 ELISA 的类型 ELISA的试剂准备 ELISA操作注意事项 一、 ELISA 的发展历程 免疫酶标记技术是继免疫荧光抗体技术和放射免疫分析之后发展起来的一大新型的血清学技术。1966年，Nakane和Avrameas等分别报道用酶代替荧光素标记抗体，建立了酶标抗体技术（enzyme-labelled antibody technique），用于生物组织中抗原的定位和鉴定。1971年，Engvall ，Van Weemen 等报道了酶联免疫吸附试验，从而建立了酶标抗体的定量检测技术。20世纪80年代，酶标记抗体检测和鉴定蛋白质分子的免疫转印技术问世，目前，免疫酶标记技术已成为免疫诊断、检测和分子生物学研究中应用最广泛的免疫学方法之一。 二、ELISA 的原理 ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合的一种敏感性很高的实验技