梅毒实验室检测讲述.pptVIP

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梅毒的实验室诊断 病原体 为梅毒螺旋体,属于密螺旋体属,苍白密螺旋体苍白亚种(Treponema pallidum subspecies pallidum) 苍白亚种 梅毒 苍白螺旋体 地方亚种 地方性梅毒 极细亚种 雅司病 密螺旋体属 品他螺旋体 品他病 梅毒螺旋体的生物学特性 1、直径 0.10~0.15μm,有8~14个致密而规则的 小螺旋,两端尖直。 2、原生质圆柱体上紧绕着3~4根周浆鞭毛,故运 动活跃,运动方式多样。 3、G-,但不易着色。Fantana镀银染色呈棕褐色。 4、在无活细胞的人工培养基中难培养,生长慢。 5、抵抗力极弱,对温度和干燥特别敏感;对青霉 素、四环素、红霉素等抗生素敏感。在干燥条件下不易生存。肥皂水和一般消毒剂以及加温42℃以上均极易将其杀灭。 梅毒螺旋体 传播途径 性接触是主要的传染途径 未经治疗的患者在感染后的1年内最具有传染性 随着病期的延长,传染性越来越小 到感染后2年,通过性接触一般无传染性 母婴传播 在妊娠7周时,梅毒螺旋体即可通过胎盘传染未经治疗者,虽已无性传播(病期2年),但妊娠时仍可传染给胎儿 病期越长,传染性越小; 输血传染 间接传播:日常用品、接吻、哺乳、医疗器械等途径(接触部位附有梅毒螺旋体) 。 梅毒的分期 梅毒的诊断 梅毒的诊断 早期梅毒(一期、二期和早期隐性梅毒)和晚期梅毒(三期和晚期隐性梅毒) 必须依靠病史、症状及实验检查进行综合分析 梅毒的实验室检查 结果对诊断有决定性意义 常用梅毒实验室检测方法 病原学检测 血清学检测 病原学检查 取材方法 一期、二期梅毒时,取硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿刺术得到的组织液 暗视野显微镜、镀银染色法和直接荧光法 在暗视野显微镜下,光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光,从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。白色发光,螺旋整齐,运动规律(旋转、伸缩或蛇行运动) 病原学检查的临床意义 病原学方法直接镜检到梅毒螺旋体,在临床可确诊梅毒,且具有快速、方便、易操作的特点。 螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最佳方法,对于患者的早期诊断、及时治疗、预后和尽早切断传染源都有十分重要的意义。 如未见到梅毒螺旋体,并不能排除患梅毒的可能性。 梅毒血清学检测方法 梅毒血清学检测分类 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 (非特异性梅毒抗体) 梅毒螺旋体抗原血清学试验 (特异性梅毒抗体) 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 原理(抗心磷脂抗体): 人体感染了梅毒螺旋体后,组织受到破坏,释放出来的一种类脂成分,与梅毒螺旋体结合形成完全抗原,刺激机体产生类脂质抗体(反应素)。 主要是IgM和IgG混合抗体。 抗体产生时间 感染3周-4周,硬下疳出现1周-2周 一般在感染后5~7周(或硬下疳出现后2~3周)产生。 抗体作用 无保护作用,治疗监测。未经治疗的病人,其血清内的反应素可长期存在。经正规治疗后,反应素可以逐渐减少至转为阴性。 原理和方法 反应原理 抗原抗体结合形成复合物,凝集成网状沉淀颗粒被肉眼所见 抗原基本成分 心磷脂、卵磷脂和胆固醇 方法包括: 快速血浆反应素环状卡片试验(RPR) 不加热血清反应素(USR) 甲苯胺红不加热血清试验(TRUST) 性病研究实验室试验(VDRL)等。 四种非特异性试验方法比较 RPR/TRUST检测流程 试验前期准备 RPR仪(水平旋转仪器) 必须滴!! 试剂 50μl移液器、吸头 记号笔、废物缸 工作服 一次性手套、口罩、帽子 生物安全柜 梅毒自动旋转仪 测速:100转/MIN (±2转) 检测流程(定性) 加样: 吸取50μl血清(浆)放在卡片圈中,并均匀地涂布在整个圈内。 加抗原: 将抗原轻轻摇匀,用试剂盒提供的针头加1滴抗原。 反应: 将卡片置梅毒自动旋转仪8分钟立即在亮光下观察结果。 检测流程(定量) 稀释液准备: 在圈内加入50μl生理盐水(根据需要确定稀释度),勿将盐水涂开。 加样: 吸取50μl血清(浆)与各圈中盐水作系列稀释,并涂布满整个圈内。 重复定性试验后两步。 凝集反应强度分级: 3+~4+:圆圈内出现中到大的红色絮状物,液体清亮。 2+:圆圈内出

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