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水稻转基因技术 * 第二组 目录 水稻装基因技术 1 外源基因鉴定 2 3 7 存在的问题与展望 * 黄金大米: 又名“金色大米”，是一种 转基因大米，由美国先正达公司研发。其不同于正常大米的主要功能为帮助人体增加维生素A吸收。因为色泽发黄，该大米品种被称为“黄金大米”。 左为普通大米，右为黄金大米 * 水稻转基因技术 基因枪法 农杆菌介导发 其他方法 PEC介导转化法 花粉管通道发 电击法 * 一、水稻转基因技术 基因枪法： 定义：又称微弹轰击法，是利用基因枪，将载有目的基因的金属颗粒加速，高速射入受体作物细胞，并随机整合到受体细胞的基因组上，然后通过细胞和组织培养技术，再生出新的植株。 原理：是将外源DNA包在微小的金粒或钨粒表面,再通过高压将微粒高速地射入受体细胞或组织。 * 应用：自1989年首先用基因枪转化玉米获得转基因植株以来,在水稻、小麦、高粱、大麦、燕麦等重要禾谷类作物中相继成功应用。 特点：具有操作简便,受体材料广泛等优点,但成本较高,转化频率较低。 * 农杆菌介导法： 定义：将外源基因插入农杆菌的质粒上,由载体将外源基因转移并整合到植物细胞基因组中去。 程序： 受体系统的建立 转化载体的构建 目的基因的转化 特点：成功率高,遗传稳定性好,可以连接不同的启动子,使外源基因在不同组织里特异表达,且载体可容纳大片段的异源DNA,所以该方法是目前最常用的转基因方法。 * PEC介导转化法： 原理：是利用化合物聚乙二醇(PEG)及高pH条件诱导原生质体体外摄取外源DNA。 特点：原生质体作为受体具有群体数大,便于操作,DNA分子易于进入,获得纯合性的转化子等优点,但原生质体培养难度大、再生频率低、周期长、不适合水稻转化研究。 * 原理:利用高压电脉冲作用在原生质体膜上“电激穿孔”，形成可逆的瞬间通道，当外源DNA附着于原生质体膜靠近电击点时，DNA就可能通过小孔进入细胞，进而整合进受体基因组，完成转化。 电击导入技术在水稻育种上应用很少。 电击导入法： * 花粉管通道法: 原理：利用植物授粉后一段时间内,从珠孔到珠心之间有一条花粉管通道,外源基因可通过此管道进入胚囊并转化尚不具备正常壁的卵、合子或早期胚胎细胞,进而借助于天然的种胚系统形成转基因种胚。 特点：简单、快速、易被人接受,但机理尚不完全清楚,目前应用并不是很多。