7细菌与病毒的遗传摘要.pptVIP

西南农业大学 第三节 细菌的遗传分析 概念：某些细菌通过其细胞膜摄取周围供体的染色体 　　　片段，将此外源DNA片段通过重组整合到自己 　　　染色体组的过程。 1928年，格里费斯(Griffith F.) 　　在肺炎双球菌中发现转化现象。 1944年，阿委瑞(Avery O. T.) 　　进行肺炎双球菌转化试验； 　　证实遗传物质是DNA； 　　转化是细菌交换基因的方法之一。 一、转化（transformation）： 转化的条件：细菌活跃摄取外源DNA分子； 　　　　　　具备重组程序所必需的酶。 转化三种细菌：肺炎双球菌； 枯草杆菌； 流感嗜血杆菌。 转化的两个例子： ①.　用两个带有不同抗性的肺炎双球菌群体混合　?　可以 　　发现带有双抗性的细菌。 　　细菌裂解　　　DNA残留　　　其它细菌摄取转化。 ②.　枯草杆菌活细胞表面分泌DNA，可被其它细胞摄取。 ㈠、供体与受体的互作： ①.　转化片断的大小： 　　肺炎双球菌转化：DNA片断至少有800个碱基对； 　　枯草杆菌的转化：DNA片断至少有16000个碱基对。 ②.　供体DNA分子存在的数目： 　　供体DNA分子数目与特定基因的成功转化有关。 　　链霉素抗性基因转化：每个细胞含有10个DNA分子之前， 　　　　　　　　　　　　　　抗性转化体数目一直与DNA分子 　　　　　　　　　　　　存在数目成正比。 　　原因：细菌的细胞壁或细胞膜上有固定数量的DNA接受 　　　　　　座位，故一般细菌摄取的DNA分子数10个。 ③．受体的生理状态： 　　感受态是处于刚停止DNA合成、而蛋白质合成继续活跃 进行时的状态。 　　活跃合成的蛋白质可使细菌细胞壁易于接受转化DNA。 　　只有感受态受体细胞才能摄取并转化外源DNA，而这种 感受态也只能发生在细菌生长周期的某一时间范围内。 ㈡、转化DNA的摄取和整合过程： 　①.　结合与穿入： 　　DNA分子结合在接受座位上(可逆)， 可被DNA酶降解；接受座位饱和性。 　　DNA摄取(不可逆)，不受DNA酶破坏。 　　穿入后，由外切酶或DNA移位酶降解 其中一条链。 　②.　联会： 　　按各个位点与其相应的受体DNA片段 联会。亲缘关系越远，联会越小、转化的 可能性越小。 ③．整合(重组)： 　　是指单链的转化DNA与 受体DNA对应位点的置换? 稳定地进入到受体DNA。 　　对同源DNA具有特异性。 异源DNA，视亲缘关系远近 也可发生不同频率整合。 黎德伯格等用枯草杆菌进行转化和重组试验： 　　DNA 片段进入受体细胞后，可与受体染色体发生重组。 紧密连锁的两个基因有较多的机会在同一个DNA片段中? 同时整合到受体染色体中。 　　三者并发转化的频率高，故这3个基因是连锁的， 其中his2和tyr1连锁最为紧密： trp2 his2 tyr1 34 13 40 　　单交换时，染色体开环易降解，故不存在单交换类型； 只有双交换和偶数的多交换才有效。 二、接合（conjugation）： 1.　概念：是指原核生物的遗传物质从供体(donor)转移到 　　　　受体(receptor)内的过程。 　特点：需通过细胞的直接接触。 不同营养缺陷型的大肠杆菌： A菌株：Met- bio- thr+ leu+， 　　　　需加甲硫氨酸和生物素。 B菌株：Met+ bio+ thr- leu-， 　　　　需加苏氨酸和亮氨酸。 　A菌株和B菌株营养缺陷型， 　不能在基本培养上生长。 　A+B菌株混合培养，在完全 　培养基上，几小时后离心，涂 　布基本培养基上，长出原养型 　(Met+ bio+ thr+ leu+)菌落。 2．实例：黎德伯格和塔特姆（1946年）： 这种原养型细胞如何出现？ A菌株 B菌株 ?　A、B菌株分别培养在基本 　培养基上 ? 一边加压和 　吸引使培养液充分混合 ? 　结果任何一臂的培养基上 　均未长出原养型细菌。 ∴直接接触(接合)是原养型 　细胞出现的必要条件。 　海斯（Hayes W.,1952)证明： 　　　接合过程是一种单向 　转移，A菌株遗传物质 ? 　B菌株，从供体（donor）到受体（receptor）。 滤片 大分子可 通过，细菌 不能通过 U型管的实验 （Davis，1950） ⑴．F 因子：致育因子(性因子)，是一种附加体。 　　携带F因子的菌株称为供体菌或雄性，用F＋表示。 　　未携带F因子的菌株为受体菌或雌性，用F－表示。 ㈠、F因子及F＋向F－的转移： ⑵．F