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第一节 限制性内切酶 Restriction Enzymes 一、限制性内切酶的发现(The discovery of Restriction Enzymes) 1．细菌限制修饰系统 （ Restriction and Modification System of Bacteria) 2．限制性内切酶的发现 1968年，从E.coli K B中分离了I型限制性内切酶EcoK EcoB。 1970年，Smith和Wilox 首次从流感嗜血杆菌（H. influenzae）Rd菌株中发现并分离到HindII限制酶。 二、限制性内切酶的分类 I 型 ：识别特定序列，切割位点在距识别位点至少1000 bp处随机切割 EcoB：TGA(N)8TGCT, EcoK: AAC(N)6GTGC II 型：识别特定序列并在识别位点处或附近切割 III 型：识别特定序列，切割位点在距识别位点3’端25~27bp处随机切割 EcoP1：AGACC EcoP15：CAGCAG 三、限制性内切酶的命名 四、限制性内切酶的识别特点 1. 绝大多数酶的识别序列是特异的，仅有少数有变动 2. 识别序列一般为4~6个碱基对，一般都富含GC 3. 大多数识别序列具有180°旋转对称的回文结构（Palindr