大豆磷脂对大黄鱼Larmichthyscrocea稚鱼与幼鱼生长与磷脂代谢的影响.pdfVIP

万方数据 万方数据 大豆磷脂对大黄鱼（Larmichthys crocea ）稚鱼和幼鱼 生长和磷脂代谢的影响 摘 要 以大黄鱼（Larmichthys crocea ）为研究对象，通过摄食生长实验，比较研究 大豆磷脂对大黄鱼稚鱼和幼鱼生长的影响，并在此基础上探讨大黄鱼磷脂代谢的 机理。本文研究内容和主要研究结果如下： 1 饲料磷脂对大黄鱼稚鱼和幼鱼生长和体组成的影响 分别以初始体重为（3.86 ±0.24 ）mg 和（7.36±0.33 ）g 的大黄鱼仔稚鱼和幼 鱼为对象，进行30d 和60d 的摄食生长实验，研究饲料磷脂对大黄鱼的生长和体 成分的影响，进而确定大黄鱼幼鱼饲料磷脂的最适需求量。仔稚鱼饲料中添加 0%、5%和12%的大豆磷脂配制等氮等脂的人工微颗粒饲料，分别投喂15 日龄 大黄鱼仔稚鱼，并以投喂生物饵料组为对照。幼鱼饲料中添加0%、2% 、4% 、 6%和8%的大豆磷脂配制等氮等脂的实验饲料。实验结果表明，随着饲料磷脂含 量的升高，大黄鱼仔稚鱼的存活率、特定生长率和终末体长呈现升高的趋势。饲 料不添加磷脂组的存活率、特定生长率和终末体长显著低于对照组和磷脂添加组 （P0.05 ），饲料磷脂添加组与对照组之间差异不显著（P0.05 ）。然而，饲料中 添加磷脂并未显著影响幼鱼的存活率和特定生长率（P0.05 ）。随饲料磷脂含量 的升高，稚鱼鱼体粗脂肪呈现升高的趋势。饲料不添加磷脂组的鱼体粗脂肪显著 低于对照组和磷脂添加组（P0.05 ），饲料磷脂添加组与对照组之间差异不显著 （P0.05 ）。随着饲料磷脂含量的升高，幼鱼鱼体粗脂肪含量呈现先下降后升高 的趋势，当饲料磷脂含量为5.86%时最低，显著低于其它处理组（P0.05 ）。随 着饲料磷脂含量的升高，幼鱼肝脏脂肪含量呈现先升高后下降的趋势。当饲料磷 脂含量为3.05%时最高，显著高于其它处理组（P0.05 ）；饲料不添加磷脂组显 著高于7.4%和9.63%添加量组（P0.05 ）。综上结果，饲料磷脂对生长的促进作 用主要在稚鱼阶段；幼鱼阶段饲料磷脂不会显著影响大黄鱼的生长，但是适宜的 磷脂添加量可能有利于脂肪的吸收转运。 2 大黄鱼磷脂代谢关键基因的克隆及其表达量随稚鱼生长发育的变化 利用同源克隆技术和RACE 技术从大黄鱼肝脏中成功扩增出5’胞苷三磷酸 I 万方数据 磷脂酰胆碱胞苷转移酶（CCT ）和胞质型磷脂酶A （cPLA ）的全长。序列分析 2 2 发现，CCT 全长2419bp （Genebank 登录号：KF006239.1 ），包括273 bp 的5’ 端非编码区，1107 bp 的开放阅读框，1010bp 的3’端非编码区，共编码369 个氨 基酸。cPLA 全长共计2550bp （Genebank 登录号：KF006240.1 ），其中5’端非编 2 码区176bp，开放阅读框2169 bp ，3’端非编码区205bp ，共编码723 个氨基酸。 系统进化树分析表明，大黄鱼的CCT 和cPLA 基因与其他鱼类的亲缘关系较近， 2 与其他物种的亲缘关系较远。应用Real-time PCR 对不同日龄的大黄鱼稚鱼CCT 和cPLA mRNA 的表达量进行检测。定量结果表明，孵化后，大黄鱼稚鱼CCT 2 和cPLA2 的表达量随日龄的变化先显著升高后显著下降并趋于平稳，且都在1