第八章吸光光度法浅析.ppt

分光光度法定量分析常要绘制标准曲线，即固定液层的厚度及入射光的波长和强度，测定一系列不同浓度标准溶液的吸光度，以吸光度对标准溶液的浓度作图（一过原点的直线），得到标准曲线。 在相同条件下测定试样的吸光度，从工作曲线查得试样浓度，这就是工作曲线法。 但在实际工作中，特别是浓度较大时，常会出现标准曲线不为直线的现象，这称为偏离朗伯比尔定律。 3、光度计组成： 光源—单色器—吸收池—检测系统 (1)光源： 要求稳定，强度高. 常用6~12V钨丝灯或卤钨灯，2600~2870K, 发320nm~2500nm的连续光谱 可见光部分用其360~800nm 紫外光：氢灯，氘灯，185 ~ 350 nm； (2)单色器： 将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置， 分为棱镜和光栅两种。 光栅的分辨率比棱镜大， 可用的波长范围也较宽。 也称吸收池，长方体，两面透明，有玻璃和石英玻璃两种，规格有0.5，1.0，2.0，5.0cm等； （3）吸收池：比色皿： 玻璃——能吸收UV光，仅适用于可见光区 石英——不能吸收紫外光，适用于紫外和可见光区 （4）检测器： 检测器的作用是接受从吸收池发出的透射光并转换成电信号进行测量。 分为光电池、光电管、光电倍增管和光电二极管阵列。 显示装置： 检流计，数显，记录仪，CRT。 练习题 1、人眼能感觉到的光称为可见光，其波长范围是 A. 400~780nm B. 200~320nm C. 200~780nm D. 200~1000nm A 2 、符合比尔定律的一有色溶液，当其浓度增大时，最大吸收波长和吸光度分别是 A. 不变，增加 B. 不变，减少 C. 增加，不变 D. 减少，不变 A 3、下列表述不正确的是 A. 吸收光谱曲线，表明了吸光度随波长的变化关系 B. 吸收光谱曲线中,最大吸收处的波长为最大吸收波长 C. 吸收光谱曲线，以波长为纵坐标,以吸光度为横坐标 D. 吸收光谱曲线，表明了吸光物质的吸收特性 C 4、影响有色物质摩尔吸收系数的因素是 A. 吸收池厚度 B. 入射光波长 C. 有色物质溶液的浓度 D. 入射光的强度 B 5、某有色物质溶液，遵守比尔定律，当其浓度为c 时，用1.00cm比色皿测得其透光度为T，，当浓度减小为0.50 c 时，，在同样条件下测定，其透光率应为 A. T 2 B. 2T C. T 1/2 D. T / 2 C 6、在光度计的检流计上刻有A 和T，二者关系为 7、某有色物质溶液，遵守比尔定律，当其浓度为c 时，吸光度A = 0.30，那么当浓度为2 c 时，该溶液的吸光度A = 0.60 第四节　 显色反应及显色条件的选择 显色反应： 将待测组分转变为有色化合物的反应。 显色剂： 与待测组分形成有色化合物的试剂。 光度分析中，对于本身无吸收的待测组分，先要通过显色反应将待测组分转变成有色化合物，然后测定吸光度或吸收曲线。 在光度分析中选择合适的显色反应，并严格控制反应条件，是十分重要的。 一、显色反应的选择 1、显色反应的类型 配位反应和氧化还原反应。 2、对显色反应的要求： （1）选择性好，干扰少，或干扰容易消除； （2）灵敏度足够高: 超高灵敏 高灵敏 中等 不灵敏 （3）有色化合物的组成恒定，符合一定的化学式。 对于形成不同络合比的络合反应，必须注意控制实验条件，使形成一定组成的络合物，以免引起误差。 （4）有色化合物的化学性质应足够稳定，至少保证在测量过程中溶液的吸光度变化小。 这就要求有色化合物不受外界环境条件的影响：如日光照射、空气中的氧核CO2；此外也不受溶液中其他化学因素的影响。 （5）有色化合物与显色剂之间的颜色差别大。 显色剂在测定波长处无明显吸收，试剂空白小。 对比度： 两有色物质最大吸收波长之差 二、显色条件的选择 1、显色剂的用量： 待测组分 显色剂 有色配合物 2、溶液的酸度 ⑴影响显色剂浓度和颜色； 显色剂不少是有机弱酸，因此酸度的变化，将影响显色剂的平衡浓度，并影响显色反应的完全程度。 ⑵影响Mn+的存在状态; ⑶影响配合物的组成 3、显色温度的选择 一般在室温，有时需加热，通过实验确定 4、显色反应时间 制作吸光度-时间曲线 5、溶剂： 降低有色化合物离解度，增加灵敏度 如在Fe(SCN)3的溶液中加入与水混溶的有机试剂（如丙酮），由于降低了Fe(SCN)3的解离度而使颜色加深，提高了测定灵敏度。 6、干扰及其消除： （1）控制溶液酸度 （2）加入络合掩蔽剂或氧化还原掩蔽剂 （3）利用氧化还原反应改变离子的状态 （4