课题1微生物的实验室培养分析.pptVIP

思考 思考 思考 涂布平板操作 对涂布器进行灼烧灭菌； 吸管头不要接触任何物体； 在火焰周围迅速操作。 接种过程中如何进行无菌操作？ 思考 将接种后和未接种（作为对照组）的培养基均放到370C的恒温箱中，培养12～24h后进行观察并记录结果。 未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 如果接种成功的话，在培养基的表面可观察到大小、形状、颜色相似的菌落。 三、结果分析与评价 1、未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有菌落生长，说明了什么？ 2、在接种大肠杆菌的培养基上，能否观察到独立的菌落？它们的大小、形状、颜色相似吗？ 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同。随着时间的延长、菌落的不断生长，使菌落不断增大。 无菌操作未达到要求：可能是培养基灭菌不彻底；可能是接种时发生了污染；也可能是在培养的过程中受到了污染。 3、培养12h和24h后，观察到的实验结果相同吗？如果不同，请分析产生差异的原因？ 4、如果在培养基上观察到不同形态的菌落，请分析其可能的原因。 将菌种接种到试管的固体斜面培养基，放入4℃冰箱中保存。以后每3~6个月，要将菌种转移到新的培养基。 四、课题延伸 1、菌种的临时保存： 2．菌种的长期保存： 3ml甘油瓶中装入1ml甘油后灭菌，再加入1ml菌液，混匀后放入-20℃冷冻箱保存。 例2：高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是 （ ） A．将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中 B．将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上 C．将转基因植物叶片接种到无菌培养基上 D．将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上 C 例3：下列有关细菌培养的叙述，正确的是（ ） A．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌 B．在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长 C．向液体培养基中通人氧气能促进破伤风杆菌的生长 D．在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动 D 例4：某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。(1)培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了___________和__________。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是__________和_____________。(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_______________。(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于__________中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种_________作为对照进行实验。 氮源 碳源? 无机盐 水 高压蒸汽灭菌 恒温培养箱 无菌水 * 一、基础知识 （一）培养基 1、概念 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 2、培养基的类型和用途 （1）按物理性质划分： ①液体培养基 ③半固体培养基 ②固体培养基 注：（固体、半固体培养基需添加凝固剂，如琼脂；两者的差别是添加量的多、少；液体培养基不加凝固剂。） （用于工业生产） （微生物保存、分离、鉴定、活菌计数） （观察微生物的运动、分类、鉴定） 液体培养基与固体培养基 （2）按化学成分划分： ①合成培养基 培养基成分明确（用化学成分已知的化合物配制） （微生物的分类、鉴定） ②天然培养基 含化学成分不明的天然物质 （工业生产） （3）按用途划分： ①选择培养基 加入某化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要微生物的生长。 （作用：分离微生物、进行选择培养，进行选择培养可以增加所需目的菌的浓度。） 青霉素 抗青霉素基因 基因工程，对导入重组质粒的大肠杆菌的筛选 不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物 加入青霉素的培养基:分离到酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 ②鉴别培养基 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同种类的微生物。 伊红－美蓝 A A B B C C D D 大肠杆菌在伊红－美蓝培养基上菌落呈现黑色 注：病毒专性活细胞寄生，目前不能利用人工培养基来培养，需接种在动植物组织中才能增值。常用于培养动物病毒的是活鸡胚。 3、培养基的成分 不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。 （1）碳源 为微生物提供所需碳元素的营养物质，需要量最大。 ①概念： ②来源： 无机碳源：CO2、NaHCO3等 有机碳源：糖类（常用的碳源尤其是葡萄糖） 、脂肪酸、花生粉饼、石油等 ③作用： 构成细胞的物质和一些代谢产物；