第十二章发酵产物分离原理与技术方案.ppt

3、超临界萃取装置与流程图 超临界萃取的方式 3、超临界萃取装置与流程图 2 （a） 5 4 1 3 2 2 （b） 5 4 1 6 3 几种典型的间歇式萃取系统 （a）单级分离 （b）两级分离 （c）精馏+分离 1.萃取釜 2.减压阀 3.分离釜 4.换热器 5.压缩机 6.分离釜 7.精馏柱 2 2 7 （c） 5 4 1 3 T T T T T T T T T T 原料 （液体） 萃取物 外回流 填料塔 残渣物 CO2 液相物料连续逆流萃取系统 4、超临界萃取实例 超临界CO2萃取柑橘香精油的设备流程示意图 1.CO2储罐 2.高压泵 3.萃取釜 4，5，6.阀门 7，8，9.分离釜 10.回流阀 四、双水相萃取技术 双水相萃取技术也叫做水溶液双相分配技术。始于20世纪60年代，从1956年瑞典伦德大学Albertsson发现双水相体系。1979年德国GBF的Kula等人将双水相萃取分离技术应用于生物产品分离。国内自20世纪80年代起也开展了双水相萃取技术研究。 双水相萃取技术的原理和特点 双水相的形成和类型 影响双水相萃取的因素 双水相系统的应用举例 1、双水相萃取技术的原理和特点 原理：目的物在不相溶的聚合物或无机盐溶液形成的两相中分配系数不同，从而进行分离。理论基础是表面自由能和表面电荷的影响。 特点：优点是能够保留产物活性、可进行连续操作或分批操作、设备要求简单、萃取容易、操作稳定、极易放大、适合大规模应用。缺点是成本较高、纯化倍数较低、适合于粗分离。 2、双水相的形成和类型 形成原因：由于高聚物之间的不相溶性，即高聚物分子的空间阻碍作用，相互无法渗透，不能形成均一相，从而具有分离倾向，在一定条件下即可分为二相。一般认为只要两聚合物水溶液的憎水程度有差异，混合时就可发生相分离，且憎水程度相差越大，相分离的倾向也就大。 离子型高聚物和非离子型高聚物都可以形成双水相系统。 常见的双水相系统： 高聚物/高聚物体系：聚乙二醇(简称PEG) / 葡聚糖(简称Dextran) 高聚物/无机盐体系：硫酸盐体系。常见的高聚物/ 无机盐体系为: PEG/ 硫酸盐或磷酸盐体系。 3、影响双水相萃取的因素 聚合物及其分子量的影响：不同聚合物的水相系统显示出不同的疏水性； pH 值的影响：改变两相的电位差； 离子环境对蛋白质在两相体系分配的影响：在双水相聚合物系统中，加入电解质时，其阴阳离子在两相间会有不同的分配。 温度的影响：分配系数对温度变化不是很敏感，只有处于临界点附近，才具有明显作用； 4、双水相系统的应用举例 例：分离和提纯各种蛋白质(酶） 用PEG/ -(NH4) 2SO4 双水相体系,经一次萃取从α- 淀粉酶发酵液中分离提取α - 淀粉酶和蛋白酶, 萃取最适宜条件为PEG1000 ( 15 %) -(NH4) 2SO4 (20 %) ,pH = 8 ,α- 淀粉酶收率为90 % ,分配系数为19. 6 ,蛋白酶的分离系数高达15. 1。比活率为原发酵液的1. 5 倍,蛋白酶在水相中的收率高于60 %。 1、定义 反胶束或称逆胶束(Reversed micelle) 是指当有机溶剂中加入表面活性剂并令其浓度超过某临界值时，表面活性剂便会在有机溶剂中形成一种稳定的大小为毫微米级的聚集体。 在反胶束中，表面活性剂的非极性基团在外与非极性的有机溶剂接触，而极性基团则排列在内形成一个极性核。此极性核具有溶解极性物质的能力，极性核溶解水后，就形成了“水池” 。 五、反胶团（胶束）萃取 2、 影响反胶团萃取的因素 （1）溶液的pH pH影响蛋白质的电荷数量和电荷性质 （2）溶液的离子强度 影响微胶团的静电状态 凡是对蛋白质所含电荷有影响的因素，如pH，以及对反胶束的静电状态有影响的因素，均能改变蛋白质的增溶作用。 （3）表面活性剂的浓度和种类 （4）其他（有机溶剂、助表面活性剂、温度） 3、应用举例 纯化和分离蛋白质　 如对于溶菌酶和肌红蛋白的混合溶液(两种蛋白质相对分子量相近,等电点分别为11. 1 和6. 8） ,用二烷基磷酸盐/ 异辛烷反胶束溶液萃取,并用缓冲液将混合液的pH 值调至9. 0 ,则溶菌酶完全进入有机相中,而肌红蛋白则留在水相. 卡那霉素离解常数（ pKa值） 卡那霉素离解曲线 ②树脂解离问题 -SO3H型　732树脂　　pK＜1　 -COOH型　DK110　　 pK 4～6　 ③卡那稳定性问题 卡那稳定存在的pH=6～8。 732树脂离子交换时溶液pH=5.5～6.0； DK110树脂离子交换时，溶液pH=6.8～7.2。 原液浓度 卡那是多元有机生物碱 离子交换理论分析 发酵水平 操作