第2讲_植物的人工繁殖解答.ppt

引言 /v_show/id_XODYyMTM0OTI=.html 1.定义 2.人工种子的优点 3.关键技术问题 （2）人工种皮制作 （3）人工胚乳配制 （4） 包埋 海藻酸钠包埋示意图 （5）贮藏与发芽 4.存在的问题 /v_playlist/f1461876o1p6.html 下节内容 ③铁盐母液：由于铁离子与其他无机元素混在一起放置时，容易生成沉淀，所以铁盐必须单独配制成铁盐母液。铁盐一般采用螯合铁（Fe-EDTA）。通常配制成100倍（或者200倍）浓度的铁盐母液，在使用时，每配制1000mL培养液，吸取10mL（或者5mL）铁盐母液。 ④维生素母液：是各种维生素和某些氨基酸的混合液。一般配制成100倍浓度的母液。在使用时， 每配制1000mL培养液，吸取10mL母液。 ⑤植物激素母液：各种植物激素单独配制成母液。一般浓度为100mg/L 。使用时根据需要取用。由于大多数植物激素难溶于水，需要先溶于有机溶剂或者酸、碱溶液中，再加水定容到一定的浓度。它们的配制方法如下： 2,4-D (2,4-二氯苯氧乙酸)母液：称取2,4-D 10mg， 加入2mL 95%乙醇，稍加热使之完全溶解，（或者用2mL 1mol/L的NaOH溶解后）加蒸馏水定容至100mL。 IAA（吲哚乙酸）母液：称取IAA 10mg，溶于2mL 95%乙醇中，再用蒸馏水定容至100mL。 IBA（吲哚丁酸），GA（赤霉酸）母液的配制方法与此相同。 NAA（萘乙酸）母液：称取NAA 10mg ，用2mL 热水溶解后，定容至100mL。 KT（激动素）母液：称取KT 10mg， 溶于2mL 1mol/L 的 HCl中，用蒸馏水定容至100mL。BA（苄基腺嘌呤）母液的配制方法与此相同。 玉米素母液：称取玉米素10mg， 溶于2mL 95%的乙醇中，再加热水定容至100mL。 4、植物组织培养的基本步骤 （1）培养材料的采集 植物具有全能性的细胞：受精卵；发育中的分生组织细胞；雌雄配子及单倍体细胞。 用哪一部分器官最适于作为组培的材料来源；器官的生理状态和年龄；取材季节、离体材料的大小、取得离体材料的植株质量等。 快速繁殖：常用茎尖（长度0.5cm）； 脱毒苗：茎尖分生组织（长度小于0.1mm）； （2）培养材料的消毒 ①先将材料用自来水洗干净，最后一遍用蒸馏水冲洗，再用无菌纱布或吸水纸将材料上的水分吸干，并用消毒刀片切成小块。 ②在无菌环境中将材料放入70%的酒精中浸泡30-60s。 ③再将材料移入漂白粉饱和液或0.01%升汞中消毒。 ④无菌水冲洗3~4次。 常用的消毒剂： 下表列出了目前常用的灭菌消毒剂。其使用浓度和处理时间，应根据外植体的情况及其对灭菌剂的敏感性而定。 消毒剂 使用浓度（%） 去除消毒剂难易 消毒时间（min） 灭菌效果 次氯酸钠 次氯酸钙 漂白粉 升汞 酒精 过氧化氢 溴水 硝酸银 抗生素 2 5~10 饱和溶液 0.1~1 70~75 10~12 1~2 1 4~50mg/L 易 易 易 较难 易 最易 易 较难 中 5~30 5~30 5~30 2~10 0.2~2 5~15 2~10 5~30 30~60 很好 很好 很好 最好 好 好 很好 好 较好 （3）制备外植体 接种时外植体的大小和形状取决于实验目的（茎、叶、根、花、果实、种子或其中某种组织切块０.5cm，茎尖、胚、胚乳按组织单位切离） （4）接种和培养 接种 封口 温度 增殖：新梢形成后，继代，把新梢分株或切段转入增殖培养基中进行增殖。 （5）根的诱导  生根是获得完整植株的一个关键。通过腋芽、不定芽、愈伤组织途径产生的芽长成试管苗，必须诱导生根才能移植。 促使试管苗生根的方法通常有两种： 一种是在固体培养基上诱导生根。当试管苗长到2～3厘米高时，将它从基部切下，转移到固体培养基上生根（生根培养基一般要求降低矿物营养的浓度，提高生长素的浓度，具体应根据植物不同而定） 。 另一种是浸泡的方法，将切下的无根试管苗泡在含有高浓度生长素溶液中，生长素浓度为100毫克/升左右，浸泡时间从几小时到1天，然后取出接种于不加任何激素的MS培养基上或者扦插在人工基质上，十天左右即可生根。 （6）炼苗和移栽试管苗的生长环境无菌 异养 弱光 恒温 芦荟的植物组织培养过程 1 2 3 4 5 6 7