噬菌体与杂菌的防治分解.pptVIP

5 噬菌体与杂菌的防治 5.1 谷氨酸发酵中噬菌体的污染与防治 噬菌体是侵染细菌、放线菌等微生物并使其细胞裂解死亡的一类病毒。它个体微小，必须用电子显微镜才能观察到。噬菌体无细胞结构，但具有一定的形态结构。其基本形态为蝌蚪状、微球状和丝状，多数呈蝌蚪形，由头部和尾部两部分组成。 有的味精厂往往由于发酵污染噬菌体而造成倒罐，使生产紊乱，甚至短期停产。多年来，国内外味精生产厂商都很重视对噬菌体的防治工作，并采取了一系列防治措施，使噬菌体污染得到基本控制，污染程度也逐步减轻，但尚未达到根治。往往轻度的噬菌体污染也会使正常生产受到困扰，并使产率下降，成本升高，对企业效益影响很大。所以，对噬菌体的防治仍然是发酵工业普遍关注的问题。 1961年在我国台湾的谷氨酸发酵工厂中最早发现噬菌体，其后1963年在日本的八代工场，乳糖发酵短杆菌No.2256即ATCC13869菌株发生溶菌现象，并从发酵罐中分离出P系噬菌体，从空气中分离出AP系噬菌体。我国是在1966年发现黄色短杆菌和北京棒杆菌AS1.299菌株污染并分离出A系噬菌体。 ①噬菌体的本质 噬菌体是病毒的一种，是一种极微小的生物，可能通过细菌过滤器，只有在电子显微镜下才能看到；能够繁殖，具有非常专一寄生性，可以认为是细胞以外的一种分子生物。 ②噬菌体的化学组成 绝大部分是DNA和蛋白质，占噬菌体重量的90%以上。少数为RNA。 5.1.1 噬菌体的化学组成 5.1.2 噬菌体的形态 表5-1 噬菌体的形态 5.1.3 谷氨酸发酵中的噬菌体 5.1.4 噬菌体的生活史 5.1.4.1 吸附 5.1.4.2 侵入 5.1.4.3 复制 5.1.4.4 成熟(装配) 5.1.4.5 释放 5.1.5 典型的噬菌体一步生长曲线 5.1.6 潜伏期、潜隐期、裂解期、裂解量 潜伏期 从噬菌体吸附细菌细胞至细菌细胞释放出新的噬菌体的最短时间。 潜隐期 从噬菌体吸附细菌细胞到细胞内从新出现噬菌体的颗粒的最短时间。 5.1.7 裂解量的计算公式 a 裂解期末平均噬菌斑数 b 潜伏期平均噬菌斑数 5.1.8 噬菌体的检测方法 ①单层平板法 ②双层平板法 ③液体培养检查法 ④平板交叉划线法 ⑤载玻片快速法 ⑥增殖检查法 ⑦快速检测法 ⑧小剂量剌激检查法 利用双层琼脂法形成噬菌斑 噬菌体的纯化和噬菌斑的形状 5.1.9 溶源性细菌与温和性噬菌体 ⑴烈性噬菌体 噬菌体侵入细菌细胞后，增殖很快，在较短时间内使细菌裂解。一般称这种噬菌体为烈性噬菌体。在谷氨酸发酵生产中遇到的多数为烈性噬菌体。 ⑵溶源性细菌和溶源性检查 ①溶源性细菌 有些细菌遭受噬菌体侵入后，并不立即裂解死亡。噬菌体侵入细胞后和寄主的遗传物质紧密结合一起，在没有再度感染的条件下，能随着细胞的繁殖，在子代细菌中代代相传，不断延续，这种细菌称为溶源性细菌。溶源性细菌通常可以自发地释放噬菌体，每一代有10-2~10-5细胞发生裂解，释放出具有感染能力的噬菌体。 ②溶源性检查 溶源性检查 在琼脂平板培养基上涂布指示菌，干燥后用接种环点20~25个被检菌培养液，经UV照射后培养，检查溶菌斑。 ⑶温和性噬菌体 产生噬菌体的潜在能力称作为溶源性，将具有溶源性的细菌称作为溶源性细菌，它所产生的噬菌体称温和性噬菌体，也称溶源性噬菌体。温和性噬菌体形成的噬菌斑是浑浊的，因为中央有溶源性细胞生成。反之，某些突变所形成的噬菌斑是清晰透明的。一般常规平板法很难把温和性噬菌体检查出来，只有在适当条件下转化为烈性噬菌体才易查出。 5.1.10 谷氨酸发酵噬菌体的主要特性 ①具有非常专一的寄生性 谷氨酸产生菌噬菌体必须在专一的寄主细胞中生长繁殖，不能脱离寄主而自行生长繁殖，也不能在培养基上增殖，只有在活的、处于繁殖阶段的寄主细胞中生长繁殖。 ②不耐热 不同噬菌体对热稳定性是不同的，但一般噬菌体都是不耐热的，会受热变性死亡。一般谷氨酸产生菌在60~65℃下10min全部致死，其噬菌体在70℃5~10min全部致死。 ③对pH 的稳定性 在pH7.0~9.0时稳定，在pH6.0以下和pH10.0以上时不稳定，容易失活，小于pH4.0时，完全失活。 ④嗜氧性 在低溶氧的条件下，其活性被抑制。 ⑤干燥条件下的稳定性 在非常干燥的状态下，5个月以上仍然稳定。噬菌体在干燥状态（相对湿度10%、30℃）比在湿润状态（相对湿度90%、30℃）稳定。 ⑥不耐药性