2-1-3 实 紫外线杀菌试验.pptVIP

（四）操作步骤 １．单用紫外线照射试验 （1）制平板---取无菌平皿6套，将已熔化并冷却至50℃左右的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基按无菌操作法倒入平皿中，使冷凝成平板。 （2）菌悬液制备--- 取试管无菌水2支，以无菌操作法分别取金黄色葡萄球菌和黏质沙雷氏菌各2环，接入无菌水中充分摇匀，制成菌悬液。 2．化学消毒剂与紫外线照射结合使用试验 (1)在无菌室内，先喷洒3％-5％的石炭酸溶液，再用紫外灯照射15min。 (2)无菌室内的桌面，凳子用2％-3％来苏尔擦洗，再用紫外线灯照射15min。 （五）实验结果 （六）思考题 1．如何证实紫外线的杀菌效果？影响紫外线杀菌效果的因素有哪些？ 2．试述高压蒸汽灭菌和紫外线杀菌的原理。 实训 紫外线杀菌试验 （一）实训目的 了解紫外线的杀菌作用原理，学习紫外线杀菌试验方法。 （二)实训原理 紫外线对微生物有强烈的致死作用，波长254nm的紫外线杀菌力最强。其杀菌机制是短波的紫外线引起细胞核酸变性导致微生物死亡。微生物对紫外线的吸收与剂量有关。剂量高低取决于紫外灯的功率、照射距离与照射时间。 （三)材料和用具 培养24-48h的金黄色葡萄球菌、黏质沙雷氏菌； 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基； 无菌水，无菌平皿，1mL无菌吸管，玻璃刮铲，灭菌五星图案纸(牛皮纸或黑纸)，紫外灯箱。 （3）接种---将已倒入培养基的平皿分为2组，每组3个，一组接金黄色葡萄球菌，一组接沙雷氏菌，用无菌吸管吸取已制好的菌悬液各0.1mL，分别接种于二组平板上，用无菌玻璃刮铲布均徐匀，随即用无菌镊子夹取无菌图案纸一张，小心放在接种好的平皿中央。 （4）分组---将接种的六个平皿分为三组，每组一个金黄色葡萄球菌，一个黏质沙雷氏菌。 （5）紫外线处理---将紫外灯光开灯预热3min。再将上述平皿置于紫外灯下，打开皿盖，在30cm距离处照射。一组照1min，l组照5min，1组照10min，小心地取下图案纸，盖上皿盖。用黑布或厚纸遮盖，送入培养室内。 （6）培养---将平皿于28~30℃温度下培养48h。 *