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3.2体外受精和早期胚胎培养(何2013).ppt
体外受精和早期胚胎发育 归纳 试管动物操作流程: 体外受精 早期胚胎培养 胚胎移植 胚胎在受体母体内发育 分娩 * * 哺乳动物体内胚胎的形成需要经过哪些过程? 精子和卵子的发生——受精——胚胎的发育 哺乳动物体外胚胎的发育需要完成哪些环节? 获得精子和卵子—体外受精—体外胚胎培养—胚胎移植 试管动物技术 人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育成早期胚胎后移植产生的后代的技术。 体外受精 卵母细胞的采集和培养 精子的采集和获能 受 精(体外进行) 卵母细胞的采集和培养 采集方法: 小型动物:促性腺激素、冲卵 大型动物: ①收集屠宰场母畜的卵巢; ②活体取卵(超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜) 培养:初级卵母细胞,体外培养至MII中期 1、有什么方法可以获得更多的卵母细胞? 2、采集的卵子是否马上可以受精? 这两种方法采集的卵母细胞多为未成熟的初级卵母细胞 冲出的为次级卵母细胞 1) 收集的方法: 1.假阴道法:体型较大的牲畜。 2.手握法: 适用于体型较小容易控制的动物,如猪犬等。 3.电刺激法:适用于野生或经济动物。 2) 获能处理: 培养法:把精子放入获能液中。 (适用对象:啮齿动物、家兔和猪) 化学诱导法:把精子放入一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中,化学药物诱导。 (适用对象:牛、羊) 精子的采集和获能 在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。 受精 1.受精卵的发育培养: 检查受精状况和受精卵的发育能力。 2.培养液的成分: 无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等 3.适时移植: 向受体移植或冷冻保存。 两盐+两素+ 两酸+一血清 早期胚胎培养 不同动物胚胎移植时间不同 牛、羊:桑椹胚或囊胚阶段 小鼠、家兔:卵裂期或囊胚阶段 试管婴儿:8个或16个细胞阶段 体外受精工厂化 技术手段: 获得精子和卵子 体外受精 早期胚胎培养 胚胎移植
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