细胞周期调控(图文并茂)分析报告.docx

细胞周期调控 PAGE13 / NUMPAGES13 第四节：细胞周期调控 佚名 一、研究背景 Rao和Johnson(1970、1972、1974)将Hela细胞同步于不同阶段，然后与M期细胞混合，在灭活仙台病毒介导下，诱导细胞融合，发现与M期细胞融合的间期细胞产生了形态各异的早熟凝集染色体(prematurely condensed chromosome，PCC)，这种现象叫做早熟染色体凝集(premature chromosome condensation)。 G1期PCC为单线状，因DNA未复制。 S期PCC为粉末状，因DNA由多个部位开始复制。 G2期PCC为双线染色体，说明DNA复制已完成。 图13-15?不同形态的PCC 不仅同类M期细胞可以诱导PCC，不同类的M期细胞也可以诱导PCC产生，如人和蟾蜍的细胞融合时同样有这种效果，这就意味着M期细胞具有某种促进间期细胞进行分裂的因子，即成熟促进因子(maturation promoting factor，MPF)。 早在1960s，Yoshio Masui发现成熟蛙卵的提取物能促进未成熟卵的胚胞破裂(Germinal Vesicle Breakdown，GVBD)，后来Sunkara将不同时期Hela细胞的提取液注射到蛙卵母细胞中，发现G1和S期的抽取物不能诱导GVBD，而G2和M期的则具有促进胚胞破裂的功能，它将这种诱导物质称为有丝分裂因子(MF)。后来在CHO细胞， HYPERLINK /Search.asp?Field=TitleClassID=keyword=%BD%CD%C4%B8 酵母和粘菌中也提取出相同性质的MF。这类物质被统称为MPF。 ?1960s Leland Hartwell以芽殖 HYPERLINK /Search.asp?Field=TitleClassID=keyword=%BD%CD%C4%B8 酵母（图13-16）为实验材料，利用阻断在不同细胞周期阶段的温度敏感突变株（在适宜的温度下和野生型一样），分离出了几十个与细胞分裂有关的基因(cell division cycle gene，CDC)。如芽殖 HYPERLINK /Search.asp?Field=TitleClassID=keyword=%BD%CD%C4%B8 酵母的cdc28基因，在G2/M转换点发挥重要的功能。Hartwell还通过研究 HYPERLINK /Search.asp?Field=TitleClassID=keyword=%BD%CD%C4%B8 酵母菌细胞对放射线的感受性，提出了checkpoint（细胞周期检验点）的概念，意指当DNA受到损伤时，细胞周期会停下来。 图13-16?裂殖 HYPERLINK /Search.asp?Field=TitleClassID=keyword=%BD%CD%C4%B8 酵母细胞周期 1970s Paul Nurse等人以裂殖 HYPERLINK /Search.asp?Field=TitleClassID=keyword=%BD%CD%C4%B8 酵母（图13-17）为实验材料，同样发现了许多细胞周期调控基因，如：裂殖 HYPERLINK /Search.asp?Field=TitleClassID=keyword=%BD%CD%C4%B8 酵母cdc2、cdc25的突变型和在限制的温度下无法分裂；wee1突变型则提早分裂，而cdc25和wee1都发生突变的个体却会正常地分裂（图13-18）。进一步的研究发现cdc2和cdc28都编码一个34KD的蛋白激酶，促进细胞周期的进行。而weel和cdc25分别表现为抑制和促进CDC2的活性。这也解释了为何cdc25和wee1双重突变的个体可以恢复野生型的表型。 图13-17?芽殖 HYPERLINK /Search.asp?Field=TitleClassID=keyword=%BD%CD%C4%B8 酵母细胞周期 图13-18?Cdc25表达不足，细胞长得过长而不分裂；Wee1表达不足，细胞很小就开始分裂了 1983年Timothy Hunt首次发现海胆卵受精后，在其卵裂过程中两种蛋白质的含量随细胞周期剧烈振荡，在每一轮间期开始合成，G2/M时达到高峰，M结束后突然消失，下轮间期又重新合成，故命名为周期蛋白(cyclin)。后来在青蛙、爪蟾、海胆、果蝇和 HYPERLINK /Search.asp?Field=TitleClassID=keyword=%BD%CD%C4%B8 酵母中均发现类似的情况，各类动物来源的细胞周期蛋白mRNA均能诱导蛙卵的成熟。用海洋无脊椎动物和两栖类的卵为实验材料进行这类实