第10章分光光度法和气相色谱法概述.ppt

吸光度最大处的波长称为最大吸收波长，用符号λmax表示。在λmax处测得的摩尔吸光系数为εmax，εmax可以更直观地反映用吸光光度法测定该吸光物质的灵敏度。 对同一物质，浓度不同时，同一波长下的吸光度A不同，最大吸收波长的位置和吸收光谱的形状相似。 对于不同物质，由于它们对不同波长光的吸收具有选择性，因此它们的λmax的位置和吸收光谱的形状互不相同，可以据此对物质进行定性分析。 对于同一物质，在一定的波长下，随着浓度的增加，吸光度A也相应增大。而且由于在λmax处吸光度A最大，在此波长下A随浓度的增大最为明显，可以据此对物质进行定量分析。 当一束平行的单色光垂直入射通过一均匀、各向同性、非散射和反射的吸收介质时，它的吸光度与介质中吸收物质的浓度及吸收介质的光路长度成正比，这就是朗伯-比尔定律，又称为光吸收定律。 吸光系数是指待测物质在单位浓度、单位厚度时的吸光度，用K来表示。按照使用浓度单位的不同，可分为质量吸光系数、摩尔吸光系数和比吸光系数。 吸光系数K与吸光物质的性质、入射光波长及温度等因素有关。 例10-1 用1，10-菲啰啉分光光度法测定铁，配制铁标准溶液浓度为4.00μg/mL，用1cm的比色皿在510nm波长处测得吸光度为0.813，求铁(Ⅱ)一菲啰啉配合物的摩尔吸光系数。 吸光度具有加和性。 当一束平行单色辐射，垂直入射，通过几种彼此不起反应的物质所组成的吸收介质时，若该吸收介质的入射、出射面是互为平行的平面，且它内部是各向同性的、均匀的、不发光不散射的，则该吸收介质总的吸光度等于几种特征吸光度的总和，即吸光度具有加和性。可用下式表示 ①非单色光引起的偏离 使用好的单色器，将入射光波长选择在被测物质的最大吸收处，以克服非单色光引起的偏离。测定时应选择适当的浓度范围，使吸光度读数在标准曲线的线性范围内。 ②溶液的性质引起的偏离 朗伯-比耳定律适用于稀溶液。溶液浓度增大，破坏吸光度与浓度的线性关系。 如果溶液中的吸光物质不稳定，发生解离、缔合、形成新化合物或互变异构等化学变化而改变其浓度，导致偏离朗伯-比尔定律。 在测量前做好样品的预处理，控制好显色反应、溶液pH和化学平衡条件等。 10.1.1.3显色反应 （1）显色反应 将无色或浅色的无机离子转变为有色物质的反应称为显色反应，所用的试剂称为显色剂。 显色反应的类型主要有氧化还原反应和配位反应两大类。 对于显色反应一般应满足灵敏度高，有色物质的ε应大于104；选择性好，干扰少，或干扰容易消除；有色化合物的组成恒定，符合一定的化 学式；要求有色化合物的化学性质 稳定，至少保证在测量过程中溶液 的吸光度基本恒定。有色化合物与 显色剂之间的颜色差别要大，显色 剂对光的吸收与有色化合物的吸收 峰波长之差（称为对比度）大于 60nm。 （2）显色剂 ①无机显色剂 许多无机试剂能与金属离子发生显色反应，但由于灵敏度和选择性都不高，具有实际应用价值的不多。 ②有机显色剂 有机显色剂分子中一般都含有生色团和助色团。生色团是某些含不饱和键的基团，如偶氮基等。这些基团中的电子被激发时所需能量较小，波长200nm以上的光就可以做到，故往往可以吸收可见光而表现出颜色。助色团是某些含孤对电子的基团，如氨基、羟基和卤代基等。这些基团与生色团上的不饱和键相互作用，可以影响生色团对光的吸收，使颜色加深。 ③多元配合物 多元配合物是由三种或三种以上的组分所形成的配合物。目前应用较多的是由一种金属离子与两种配位体所组成的三元配合物。多元配合物在吸光光度分析中应用较普遍。 （3）显色反应条件 ①显色剂用量 需加入过量显色剂，以减少反应的可逆性。显色剂加入太多，引起副反应，显色剂的适宜用量是通过实验来求得的。 实验方法：固定被测组分的浓度和其他条件，只改变显色剂的加入量，测量吸光度，作出吸光度一显色剂用量的关系曲线，当显色剂用量达到某一数值而吸光度无明显增大时，表明显色剂用量已足够。 ②溶液的酸度 酸度影响显色剂的平衡浓度和颜色，影响被测金属离子的存在状态，影响配合物的组成。显色反应的适宜酸度是通过实验来确定的。 实验方法：通过实验作出吸光度-pH关系曲线，从图上确定