人胎盘泌乳素.doc

?人胎盘泌乳素 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围：???????????????????????????????????????????????????????? ?96T 0.6μg/ml-30μg/ml ? 使用目的： 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中胎盘泌乳素(PL)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人胎盘泌乳素(PL)水平。用纯化的人胎盘泌乳素(PL)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入胎盘泌乳素(PL)，再与HRP标记的胎盘泌乳素(PL)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的胎盘泌乳素(PL)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中人胎盘泌乳素(PL)浓度。 操作步骤 1.???????? 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 12μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 1.5μg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 ? ? 2.???????? 加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3.???????? 温育：用封板膜封板后置37温育30分钟。?? 4.???????? 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5.???????? 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。 6.???????? 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7.???????? 温育：操作同3。 8.???????? 洗涤：操作同5。 9.???????? 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37避光显色15分钟. 10.???? 终止：每孔加终止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11.???? 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。 ? 注意事项 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4．?请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值)，请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5．?封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。 保存条件及有效期 1．试剂盒保存：；2-8。 2．有效期：6个月 ?