微生物的实验室培养解答.ppt

（2）在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 （3）在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 3个划线平板 1个不划线平板 （重复实验） （空白对照） （3）培养 放入37℃恒温箱中培养12h～24h 2.稀释涂布平板法 ①菌液的梯度稀释： ②涂布平板操作： (1)概念与原理： 聚集的微生物 单个细胞 菌液梯度稀释 菌落 涂布平板 (2)操作： 生长繁殖 ①系列梯度稀释操作 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 注意：移液管需要经过灭菌；试管口和移液管离火焰1～2cm处。 ②涂布平板操作： (1)涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？ 答：应从操作的各个细节保证“无菌”。 例如:①酒精灯与培养皿的距离要合适 ②吸管头不要接触任何其他物体 ③吸管要在酒精灯火焰周围等等 各梯度分别涂布3个平板 1个不涂布作空白对照 稀释103倍 稀释104倍 稀释105倍 放入37℃恒温箱中培养12h～24h （3）培养 1.临时保藏： 试管固体斜面培养基上 4℃ 2.长期保存： 菌种易被污染、变异 甘油管藏 1ml甘油＋1ml菌液 －20℃ 三 菌种的保存 3～6个月，转移培养 四 成果评价 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 （二）接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求。 （一）培养基的制作是否合格 （三）是否进行了及时细致的观察与记录 培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微的变化。 D 1、下列有关平板划线接种法的操作错误的是 （ ） A．将接种环放在火焰上灼烧 B．将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液 C．蘸取菌液和划线要在火焰旁进行 D．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连 2．有关倒平板的操作错误的是（ ） Ａ．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰 C．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上 D．等待平板冷却凝固后需要倒过来放置 C 4.涂布平板操作需要用到（ ） A.接种环、滴管、酒精灯 B.接种环、移液管、酒精灯 C.涂布器、移液管、酒精灯 D.涂布器、接种环、酒精灯 3.有关稀释涂布平板法，叙述错误的是（ ） Ａ．先将菌液进行一系列的梯度稀释 Ｂ．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面 Ｃ．适宜条件下培养 D.结果都可在培养基表面形成单个的菌落 C D 6．以下操作用到接种环的是（ ） A．平板划线操作 B．系列稀释操作 C．涂布平板操作 D．倒平板操作 5．微生物培养过程中，肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯 草杆菌的重要依据是（ ） A．细菌的大小、形状、颜色 B．菌落的大小、形状、颜色 C．有无鞭毛 D．培养基的不同 B A 7．能排除培养基是否有杂菌污染的方法是（ ） A.将未接种的培养基放在实验桌上培养 B.将未接种的培养基放在窗台上培养 C.将未接种的培养基放在恒温箱中培养 D.将已接种的培养基放在恒温箱中培养 8．要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用（ ） A．固体培养基　　　　　　　　　　 B．液体培养基 C．加入青霉素的培养基　　　　　　 D．加入高浓度食盐的培养基 A C 学科网 9．农田土壤的表层，自生固氮菌的含量比较多，将用表层土制成的稀泥浆，接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其它细菌分开，对培养的要求是（ ） ①加抗生素 ②不加抗生素 ③加氮素 ④不加氮素 ⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦37℃恒温箱培养 ⑧28 ℃--30℃温度下培养 A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．②④⑤⑧ D．①④⑥⑦ C 10．下列有关微生物的培养或纯化的叙述，错误的是　 　（　　　　） A．微生物在培养前要先对培养基进行灭菌处理再接种 B．培养液中溶氧量的变化会影响酵母菌的繁殖和代谢 途径