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高产糖化酶菌株紫外线诱变育种;目录;概念： (induced mutation breeding) 利用物力和化学因素诱导生物发生遗传变异，再通过选择育成新品种的方法。 诱变育种可分为： 物理诱变育种 化学诱变育种 ;1. 培育新品种 利用理化诱变育种始于20世纪20年代，40年代育成了一批新品种。我国诱变育种工作始于50年代。诱变育种在早熟、抗病、优质、矮秆等方面较为突出。 2. 丰富种质资源　　利用诱变育种可人工创造新的种质资源 , 作杂交亲本间接利用培育新品种。 ;;; ;其它物理诱变因素;;;;;用化学诱变剂相对于物理诱变的优缺点： 1、大多数情况下，就突变数量而言，要比电离辐射更有效。 2、化学诱变剂是很经济的，因为只需要少量的合适的诱变剂，设备是实验室的一般玻璃器皿，一个蒸气罩。而用电离辐射进行工作时，设备费用大，并要注意安全性。 3、大部分诱变剂是致癌剂，所以在使用中必须非常谨慎，要避免化学诱变剂与皮肤接触，，且切勿吸入其蒸气，有人对某些诱变剂极其敏感，甚至未直接接触就会过敏，这就更要当心。 ;诱变育种前的准备工作;(一)诱变育种的一般步骤 利用各种诱变剂处理微牛物细胞，提高基因的随机突变频率，扩大变异幅度，通过一定的筛选方法，获取所需要优良菌株的过程，称为诱变育种。诱变育种包括诱变和筛选两个部分： ①以合适的诱变剂处理大量而均匀分散的微生物细胞悬浮液，在引起绝大多数细胞致死的同时，使存活个体中DNA结构变异频率大幅度提高。 ②用适宜的方法淘汰负效应变异株，选出极少数性能优良的正变异株，以达到培育优良菌株的目的。 在整个诱变育种工作中，工作量最大的是筛选。分离后得到的菌落，真正能发生性能变好的所谓正突变为数极少，要从几千万个菌落中选出几个好的，工作量可想而知。具体筛选的方法同自然选育中的筛选方法，这里不再重复介绍。诱变育种的典型流程如下图所示。;; (二)诱变育种应注意的问题 诱变成功的关键包括出发菌株的选择、诱变剂种类和剂量的选择，以及合理的使用方法等。 1．出发菌株的选择 出发菌株是指用于育种的起始菌株(parent strain)。作为出发菌株，一般应具备特定生产性状的能力或潜力、对诱变剂的敏感性大、变异幅度广等条件。 出发菌株通常有三种：一是从自然界分离得到的野生型菌株；二是通过生产选育，即由自发突变经筛选而得到的高产菌株；三是已经诱变过的菌株，这类菌株作为出发菌株较为复杂，一般认为已经诱变获得的高产菌株，再诱变易产生负突变，再度提高产量比较困难，但有些高产突变往往需要经过逐步累积的过程，进行多步诱变可以获得高产菌株。; 2．诱变因素的选择 在微生物诱变育种中，诱变处理主要采用物理诱变剂和化学诱变剂。目前常用的诱变剂主要有紫外线(UV)、7射线、硫酸二乙酯、N一甲基一NL硝基一N一亚硝基胍(NTG或MNNG)和亚硝基甲基脲(NMU)等。后两种因有突出的诱变效果，被誉为“超诱变剂”。诱变的方法有单一诱变剂处理和复合诱变剂处理。选择诱变剂时应考虑使用的方便性和有效性，若经过诱变，正突变株出现率较高，所用的诱变剂则为有效诱变剂。对于野生菌株，使用单一诱变因素有可能取得较好的效果；但是，对于已经诱变过的菌株，单一诱变因素重复使用的效果不佳，这时可利用两种以上诱变因素交替使用，以提高诱变效果。; 3．诱变剂剂量的选择 各种诱变剂有不同的剂量表示方法，例如，紫外线的强度是尔格(1 erg一10-7 J)，X射线的单位是伦琴(R)或拉德(rad)等，化学诱变剂的剂量则以在一定温度下诱变剂的浓度和处理时间来表示。但是，仅采用诱变剂的理化指标控制诱变剂的用量常会造成偏差，不利于重复操作。 诱变剂的剂量与致死率有关，而致死率又与诱变率有一定关系，因此，可用致死率作为各种诱变剂的相对剂量，用以选择各种诱变剂的剂量。对不同的微生物使用的剂量不同，通常情况下，高剂量诱变剂处理后获得的负突变率较高，而在偏低的剂量处理中获得的正突变率较高，目前诱变剂处理剂量一般选择死亡率为70％～80％时的剂量。但是，在多核细胞中，仍然采用高剂量，因为在高剂量诱变时，除个别核发生突变外，其他核均被致死，可形成较纯的变异菌落，同时也造成遗传物质的巨大损伤，可减少回复突变。; 4．单孢了(或单细胞)悬液的制备 诱变育种要求所处理的细胞必须是处于对数生长期同步生长的细胞，并且是均匀状态的单细胞悬液。细胞的生理状态对诱变处理会产生很大的影响，细菌一般在对数生长期的诱变处理效果较好，而霉菌和放线菌的分生孢子在稍加萌发时进行诱变处理可提高诱变效率。分散状态的细胞可以均匀地接触诱变剂，避免长出不纯的菌落。 由于在许多微生物的细胞内同时含有