实验2_环境因素对植物水分状态的影响研讨.pptVIP

植物生理学实验（36学时,2学分） ;选用的实验教材; 植物生理学实验技术基础 植物组织含水量和组织水势（小液流法） 气孔状态观察（固定、印迹法） 硝酸还原酶活性的测定（磺胺比色法） 叶绿体色素的测定和分析（Arnon法） 萌动种子呼吸速率（小篮子法） 快速测定种子活力的方法和比较（TTC等法） 植物激素对种子萌发、胚根和胚芽生长影响（生物检测法） 植物细胞膜透性检测（电导法）;;实验题目实验目的及原理实验步骤结果与分析本实验注意事项思考题;; 一、 植物组织含水量的测定二、 植物组织水势的测定;一、植物组织含水量的测定;测定植物组织含水量的指标;植物组织相对含水量(RWC);烘之前 1 总重 2 皮重 105℃烘10 min, 70-80 ℃ 烘至恒重 3 总重 4 皮重 ;器材： 小白菜(新鲜叶片，萎蔫叶片)； 打孔器、橡胶垫； 称样铝盒； 烘箱、搪瓷盆、棉布手套； 天平;铝盒号;二、 小液流法测定植物组织水势;将植物组织分别放在一系列梯度浓度溶液中， ①植物组织的水势﹤溶液的渗透势，组织吸水而使溶液浓度变大，比重变大； ②植物组织的水势﹥溶液的渗透势，组织水分外流而使溶液浓度变小，比重变小； ③植物组织的水势 = 溶液的渗透势，外部溶液浓度不变，比重不变。;;用溶液的渗透势(ψπ)代表植物水势(ψw)。 ????ψw＝ψπ＝－iCRT （单位：兆帕，MPa） i： 解离系数（蔗糖=1.00;CaCl2=2.60;NaCl=1.80） C：等渗浓度（mol/L) R：气体常数0.008314 L· MPa /（mol · K） T：绝对温度（273+摄氏温度） ;材料：小白菜（新鲜叶组和萎蔫叶组） 仪器设备： 注射针头 打孔器, 橡胶垫 刻度试管（15ml x 12支），小试管(12支) 试剂：1 M 蔗糖，纯水，甲烯蓝粉;;随机取相同叶位叶圆片各10片、从刻度试管中取3ml蔗糖溶液，分别放入和移入小试管中，并使叶圆片完全浸没于溶液中。 30分钟后，回型针尖沾少许甲烯蓝入小试管，混匀，然后用清洁注射针头依次取小试管中的蓝色液体，伸入相应标号刻度试管溶液中部，注滴同时观察并记录液滴动态。;;轻捏吸管,放入刻度试管;蔗糖溶液浓度(mol/L);蔗糖溶液浓度(mol/L);蔗糖溶液浓度(mol/L);幼嫩新鲜叶片的 C 可能 0.1;蔗糖溶液浓度(mol/L);蔗糖溶液浓度(mol/L);1.计算新鲜和萎焉叶片的鲜重含水量,并进行比较分析； 2.记录不同浓度溶液中的液流方向，并计算两组叶片的水势； 3.合并比较分析两组叶片的含水量和水势规律。;拭干叶表水分和泥渍 避开大的叶脉打叶圆片,混合均匀 移液管取溶液和纯水 配制的蔗糖溶液要混匀 润洗移液管和针头（放回原液） 叶圆片浸入溶液中 室温下浸泡30分钟后再染色 尽量少加甲烯蓝 轻压胶管使针筒少量吸入染色溶液 滴入后，停止挤压或放松胶管;配套教材;液相平衡法：小液流法、称重法、质壁分离法 压力平衡法：压力室法气相平衡法：露点法 ;实验二：光和K+ 对气孔运动的调节（p115）;三、压力室法测定植物组织水势 （如果有时间则讲解） ; 将叶片装入压力室钢筒，叶柄切口朝外，逐渐加压，直到导管中的液流恰好在切口处显露时，所施加的压力正好抵偿了完整植株导管中的原始负压。这时所施加的压力值（通常称为“平衡压”）将叶片中的水势提高到相当于开放大气中导管中液体渗透势ψs（sap）的水平（图C）。; 由于通过导管周围完整活细胞半透膜进入木质部导管的汁液，其渗透势常接近于零???活性溶质含量很低）。因此，下式成立： P +ψw=ψs≈0 →ψw=﹣P 式中： P — 平衡压（正值）； ψw — 叶片或枝条的水势（负值）； ψs — 木质部汁液的渗透势。;植物材料: 梧桐枝条;操作步骤;1．装样时螺旋环套不要拧得太紧，以免压伤植物 组织。2．加压速度不能太快，接近叶片水势时加压速度 要放慢，否则会影响测量精度。3．注意安全，加压时不要使脸部处于钢筒顶盖正 上方。4．高压钢瓶有危险，搬运或使用时要注意。