医学检验方法学的评价.ppt

检验医学方法学的评价;*;*;第一节 检验方法学评价的重要性 ;二、检验方法的评价是合理解释实验室数据的基础。; 因此在引进新技术的同时，必须及时开展与临床的合作和对话，以强化对实验室数据的合理解释与有效利用，及时将数据转化为高层次的临床判断分析信息 。;*;*;*;⑸、反应温度与时间； ⑹、吸收曲线与波长选择； ⑺、线性范围等。;*;3．最后评价： ⑴ 、作日间重复实验； ⑵ 、方法学比较实验； ⑶ 、判断方法的可接受性； ⑷ 、进行临床相关研究。;4．方法应用： ⑴、建立质控系统； ⑵、训练操作者； ⑶、引进常规应用； ⑷、常规性能管理。;*;1、决定性方法（Definitive methods） 指准确度最高，系统误差最小，经过详细研究，没有发现产生误差的原因或在某些方面不够明确的方法，测定结果为“确定值”，与“真值”最接近。;条件：技术要求太高且复杂，费用昂 贵， 仪器精密、试剂最纯。 用途：不能直接用于鉴定常规方法的 准确性，只用于发展及评价参 考方法和标准品。;2、参考方法（Reference methods） 指准确度与精密度已经充分证实的分析方法，干扰因素少，系统误差很小，与重复测定的随机误差相比可以忽略不计，有适当的灵敏度、特异性、直线性及较宽的分析范围。 ;条件：所需仪器的要求也较高，昂贵，试剂要求二级标准品，纯度高、杂质少，在条件优越的实验室可进行常规 工作。 用途：主要应用于鉴定常规方法，评价其误差大小，干扰因素，并决定其是否可以被接受。它也用于鉴定二级标准品，为质控血清定值，也可用于评价商品试剂盒等。 ;*;临床化学方法之间关系可见下图。 ;　 国际标准化委员会将标准品（参考物）的定义暂定为：它的一种或几种物理或化学性质已经充分确定，被用于校正仪器或证实一种测定方法的物质，并将其分成三级。 标准物质的定值结果一般表示为： 标准值 ± 总不确定度。;1、一级标准物质（ primary reference material ） 一级标准品（原级参考物）是已经确定的稳定而均一的物质，它的数值已由决定性方法确定，或由高度准确的若干方法确定，所含杂质也已经定量。它可用于校正决定性方法，评价及校正参考方法以及为“二级标准品”定值。;2、二级标准物质（secondary reference material） 二级标准物质的量由参考方法定值或用一级标准品比较而确定，主要用于常规方法的标化或为控制物定值。 二级标准品或是纯溶液（水或有机溶剂的溶液），或存在于相似基质中。 ;*;4、质控物（ control material ） 具有与检测过程相适应的特性，其成份与检测样本的基质相同或相似。用于质量控制，不用于标化。;国际临床化学协会（IFCC）提出： 常规方法应具有实用性和可靠性两方面的性能指标，至于某一项具体分析方法所应具有的性能标准，可由临床实验室根据采用这一试验的目的决定。;*;*;*;*;（一）、方法建立的原理确定 　　临床生化方法按其传统分类可分为光谱法、层析法、电泳法、酶法、电化学法、分子生物学和免疫化学法等，这些方法的建立首先要根据其技术的原理和被测物质的物理化学性质来确定其方法建立的原理。;（二）、方法建立时的条件选择 　　 在方法建立的原理确定后，尚需根据其原理来选择合适的条件，以保证所建的方法可靠。下面以光度法为例介绍其条件选择的主要环节：; 颜色反应是光度分析的基础，因此，用作光度测定的颜色反应至少要具备以下几条： a、反应有较高的特异性，从而干扰小； b、反应产生的有色物质吸光系数要大，大者灵敏度高； c、有色产物的离解度要小，小则稳定； d、此外，还要求有色产物有恒定的组成成分，使产生的颜色稳定。; 由于影响颜色反应的因素很多，如温度、pH、试剂浓度、反应的时间等等。这些因素在建立新方法时都要逐项试验，确定最佳实验条件;*;△A＝A标准－A空白 △A最大时的波长(即干扰最小)为最适波长;*;2、测定方法适用的浓度范围——线性实验 　　根据郎伯-比耳定律吸光度应与溶液的浓度成正比。 测定方法适用的浓度范围是指分析的浓度范围在直线线性段，浓度与吸光度之比为一常数，此时直线上任何一点的斜率tanθ相等，即： 　　tanθ＝A1/C1＝A2/C2＝A3/C3＝……＝An/Cn＝K 此处K即为校正常数，可用于结果计算。 ;