4.琼脂糖凝胶电泳检测dna-2013zj分析.ppt

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2016-07-25 发布于湖北
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实验四琼脂糖凝胶电泳检测DNA;【一】实验目的;【二】实验原理;琼脂糖浓度(%);;【三】实验仪器、材料与试剂;凝胶电泳系统;?凝胶成像分析系统;MC Marker;常用电泳缓冲液;电泳指示剂溴酚兰在碱性液体中呈紫兰色，一般与蔗糖、甘油或聚蔗糖400组成上样缓冲液。作用： ①增加样品比重，以确保DNA均匀沉入加样孔内。 ②形成肉眼可见的指示带，预测核酸电泳的速度和位置。 ③使样品呈色，使加样操作更方便。 ;溴化乙锭;【四】实验步骤;（1）制备凝胶和胶板： 40ml(1×TBE)+0.4g琼脂糖（三角瓶），煮胶，溶解，冷却至60℃(不烫手)，倒板(4-6mm)，室温下充分凝固，竖直拔下梳子。 ;（2 ）加样： 20μl PCR产物 10μl质粒DNA+2μl上样缓冲液，混匀酶切产物DNA+上样缓冲液，混匀 6μl DNAMark （3 ）电泳：电压3-5V/cm，约80-90V，注意电极方向（4 ）染???：EB染色约15min （5 ）图像采集：凝胶成像系统观察结果。 ;制胶;点样;电泳;图像采集;;【五】实验结果