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单克隆抗体技术张阳 ;提纲单克隆抗体的概念单克隆抗体;1975年英国科学家Milst;一、单克隆抗体的概念(mono;B淋巴细胞在抗原的刺激下,能够;杂交瘤技术通过融合经过免疫的小;二、单克隆抗体的制备(一)制备;单克隆抗体制备原理HAT培养基;单克隆抗体的制备原理;经HAT选择后的各种细胞的结果;无标题;(二)基本制备流程;(三)单克隆抗体的制备步骤1、;1、免疫原的制备颗粒性抗原:病;2、免疫动物(1)动物选择:一;2、免疫动物 可溶性抗原(蛋白;为什么要多次免疫小鼠?正常小鼠;3. 骨髓瘤细胞的准备 细;4. 细胞融合(1)细胞融合;(3)提高融合频率的可能途径 ;致敏淋巴细胞骨髓瘤细胞离心 1;5. 杂交瘤细胞及阳性孔的筛;融合细胞的筛选方法A)ELIS;6. 阳性孔的检测;6.融合细胞的克隆 ;有限稀释法计数103/ml10;7. 单克隆抗体的制取制取方;(1)体外制备体外使用旋转培养;(2)体内制备体内腹腔注射杂交;杂交瘤细胞的冻存 ;杂交瘤细胞通常用含有8%--1;单克隆抗体的特性① 单一特异性;局限性(1)单克隆抗体固有的亲;三、单克隆抗体的应用 单;(1)药物与抗体直接偶联通过化;小分子交联剂:同型双功能:戊二;单抗药物特异性溶解血栓药物抗肿;无标题;单抗药物面临的问题单抗药物还存;无标题
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