丹参对铁超载小鼠肾脏损伤的保护作用和机制研究.pdf

缺口末端标记法?腿?检测细胞凋亡；用火焰原子吸收光谱法分析丹参对铁超载小鼠肾脏损伤的保护作用及机制研究目的：铁对新陈代谢和生物活动具有很重要的意义。然而，过多的铁铁超载的方法主要是使用螯合剂，但是存在着一些缺点，比如，斛功能障织迅速放入液氮中冷冻，采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶???榈嫉?用来观察组织中铁的沉积情况。剩下部分组织分别作苏木素和伊红摘要会沉积在肝脏、心脏、肾脏等组织中，造成组织器官氧化损伤。目前治疗碍，过敏反应，粒细胞缺乏症，患者依从性较差等。因此，研究开发治疗铁超载疾病的新药品是十分有意义的。丹参具有抗脂质过氧化作用和清除羟基自由基的能力。因此，我们推测，丹参可能对铁超载致肾脏损伤具有保护作用。本研究的目的是探讨丹参注射液对铁超载致肾毒性的保护作用及可能的作用机制。方法：将?只小鼠随机分为?椋?直鹞?瞻锥哉兆椤⑻??啬Ｐ妥椤?去铁胺阳性药物对照组、丹参注射液低剂量治疗组和丹参注射液高剂量治疗组，每组?只。其中，丹参注射液低剂量组和丹参注射液高剂量组小鼠分别腹腔注射丹参注射液??痥?痙和??痥?痙，去铁胺阳性药物对照组小鼠腹腔注射去铁胺???／?／??瞻锥哉兆楹吞??啬Ｐ投哉兆榉直?注射等量的生理盐水。然后，在腹腔注射给药?∈焙螅???啬Ｐ妥椤?去铁胺阳性药物对照组、丹参注射液低剂量组和丹参注射液高剂量组小鼠均腹腔注射右旋糖酐铁??／?／??瞻锥哉兆樾∈笞⑸涞攘康纳?硌?水。在第?天于末次给药后，称量小鼠的体重，然后用戊巴比妥钠麻醉。取血，分离血清，以便于用试剂盒检测血清中肌酐??和尿素氮???等水平。迅速分离小鼠肾脏组织，并用冰预冷的生理盐水洗涤，取部分组肾脏匀浆中的铁浓度；采用试剂盒测定肾组织中谷胱甘肽过氧化物酶??．??⒊?趸?锲缁????的活性以及丙二醛???暮?量。剩下的肾脏组织浸泡在?ザ嗑奂兹┲校?徊糠肿橹?銎章呈坷度旧ǎ????旧ā??染色、????旧ǎ?糜诓±硇翁?У募觳狻?中文摘要 与空白对照组相比，铁超载模型组小鼠的血清??虲??匠???丹参注射液低剂量组和丹参注射液高剂量治疗组的小鼠的血清???采用高效液相色谱法测定丹参注射液主要成分。加量则明显高于铁超载模型组?直鹗鞘??????????????。?げ巫⑸湟憾陨鲈嘀刑?章呈坷度旧ń峁?挠跋?结果：?げ巫⑸湟旱闹饕3煞址治?结果显示，丹参注射液中含有的丹参素，原儿茶醛和丹参酚酸??浓度分别是????．?和????げ巫⑸湟憾孕∈筇逯氐挠跋?与空白对照组小鼠相比，铁超载模型组的小鼠体重增加明显降低???．??Ｈ欢??げ巫⑸湟旱图亮孔椤⒌げ巫⑸湟焊呒亮孔楹腿ヌ?费粜?对照组小鼠的体重结果说明铁超载小鼠给予丹参和去铁胺治疗后，体重增与正常肾脏组织相比较，在铁超载模型小鼠的肾小球中存在着大量的沉积铁。然而给予丹参和去铁胺治疗后，肾小球中铁的沉积量则明显下降。?げ巫⑸湟憾孕∈蟛±硇翁?У挠跋?空白对照组小鼠的肾脏组织没有明显的形态学改变。然而相比之下，铁超载模型小鼠的肾脏则出现了显著的组织学改变。损伤情况评估分数也直接显示出铁超载模型组的肾小球损伤和肾小管间质损伤接近于正常肾脏组织的?倍，两者之间呈现显著性差异?????。当给予铁超载小鼠低剂量和高剂量丹参注射液治疗后，肾小球损伤和肾小管间质损伤程度降低?％．?％，有显著性差异?????。?げ巫⑸湟憾孕∈笊鲈嘧橹?刑?粱?挠跋?铁超载模型组的小鼠的肾脏组织中存在着大量的沉积铁。但是，在给予丹参治疗后，小鼠肾脏中铁的含量明显下降?????。?げ巫⑸湟憾孕∈笱G逯蠦?和?的影响明显升高的现象??．??５?牵?胩??啬Ｐ妥樾∈笙啾冉希?谒???水平已经表现出明显的降低趋势，并且有显著性差异?????。?げ巫⑸湟憾孕∈笊鲈嘧橹?蠸?、???、??挠跋?与空白对照组相比，铁超载模型组的肾脏组织中??虶????活性明显降低?????。但是与铁超载模型小鼠肾脏组织相比，去铁胺中文摘要?／?。 げ巫⑸湟憾孕∈笊鲈嘞赴?蛲龅挠跋?超载模型组的肾脏组织中肾管状细胞凋亡明显增多，???粜允?恳?组和丹参治疗组的小鼠肾脏中，这两种酶的活性的下降趋势明显减小???．??４送猓???啬Ｐ妥樾∈蟮纳鲈嘧橹?械腗?的浓度比空白对照组明显增高?????。可是，给予丹参治疗后，??ǘ让飨缘陀?铁超载模型组??．???空白对照组肾管状细胞凋亡程度维持在一个较低水平。相比之下，铁明显增多??．??８?璧げ巫⑸湟褐瘟坪螅琓??阳性的肾管状细胞数量显著减少??．???结论：我们的研究结果表明丹参注射液能够抑制铁超载引发的肾脏损伤。丹参的这些对抗铁超载损伤的作用机制很可能与抑制铁的沉积、抑制脂质过氧化、减少细胞凋亡等有关。关键词：铁超载；丹参；肾毒性；脂质过氧化；细胞凋亡中文摘要 ．???????????????????：?????．?????????