实验三家兔HbRBC脆性测定及影响.pptVIP

实验三 1、血红蛋白的测定(比色法) 2、红细胞脆性的测定 3、影响血液凝固的因素;血红蛋白的测定（P80） 1 目的 掌握比色法测定动物血红蛋白含量的方法。 2 实验原理 血红蛋白的量与血液颜色呈正相关;3 主要材料 家兔、沙里氏血红蛋白计、0.1N盐酸 4 方法与步骤 4.1 清洗：血红蛋白吸管、比色管； 4.2 将0.1N盐酸加入比色管中至刻度“2”处； 4.3 加样：用血红蛋白吸管取血20μL，加入盐酸中，并利用上层盐酸将吸管内壁洗涤2-3次（避免起泡）； 4.4 酸化10min以上； 4.5 比色； 4.6 读数： 绝对数：每100mL血液中血红蛋白的克数； 相对数：;5 注意事项 5.1 血红蛋白吸管和比色管要清洁； 5.2 取血要准确； 5.3 避免比色管内起泡； 5.4 蒸馏水要逐滴加入，防止过量； 5.5 酸化时间不能少于10min； 5.6 在自然光下比色，比色无刻度一方朝外。;红细胞脆性的测定（P82） 1 目的 学习测定红细胞渗透脆性的方法，理解溶液渗透压在维持细胞正常形态中的作用。 2 原理 红细胞膜对低渗溶液的抵抗力，称为RBC渗透脆性。 用低渗NaCL溶液的浓度表示：最小抵抗、最大抵抗 ;3 实验动物：家兔 4 方法与步骤 4.1 溶液配置 表2 不同浓度NaCl溶液配制;4.2 制备抗凝血：柠檬酸钠抗凝血。 4.3 加抗凝血：每只试管加1滴，轻轻混匀。 4.4 静置1h 4.5 观察结果 4.5.1 未溶血试管： 出现分层现象，下层红色浑浊，上层为无色透明。 4.5.2 不完全溶血试管： 出现分层现象，下层红色浑浊，上层为淡红色透明。 4.5.3 完全溶血试管： 无分层现象，完全淡红色透明。;6 注意事项 6.1 试管要洁净、干燥； 6.2 配液要准确； 6.3 加血量要一致，1D； 6.4 轻轻倾倒试管2-3次混匀，避免机械溶血； 6.5 静置时间保证1h，防止中途人为振动； 6.6 在光线明亮处观察结果。;影响血液凝固的因素（P88） ;3 动物：家兔 4 方法与步骤 4.1 家兔的麻醉、保定与手术 33%乙醇溶液，6mL/kg，耳缘静脉注射。 4.2 试管准备 4.3 颈动脉采血 4.4 记录凝血时间;5 实验结果 表1 血液凝固及其影响因素;6 注意事项 6.1 采血过程要尽量快，以减少计时误差； 6.2 每支试管口径大小及采血量要相对一致； 6.3 液体石蜡管内多余石蜡应尽量弃除； 6.4 判断凝血的标准要一致，一般以倾斜试管 达30-45°时试管内血液不见流动为准。;表1 不同浓度NaCl溶液配制;实验报告撰写格式有要求;家兔Hb、RBC脆性测定及影响血凝因素的观察