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第二章 分子吸光分析法(吸光光度法);第一节 光谱分析法导论;紫外-可见吸收分光(吸光)光度法
;第二节 吸光光度法基本原理 ; 物质的颜色是由于物质对不同波长的可见光具有选择性吸收作
用而产生的。; 紫外-可见吸收分光光度法
是基于被测物质的分子对200~750nm的光具有选择性吸收的特性而建立起来的分析方法。;思考:分光光度法是基于被测物质的分子对光具有选择性吸收的特性而建立起来的分析方法。
那么,利用分光光度计测定吸光溶液的吸光程度时,该溶液必须是有色溶液吗?;吸光度: ;2 光的吸收定律---- 朗伯-比尔定律;A = -lgT = Kbc
;一有色溶液的浓度为c,透光率为T。求浓度为原来的1/2时,透
光率为多少? ;每100mL中含有0.701mg溶质的溶液,在1.00cm吸收池中测的
透光率为40%,试计算(1)此溶液的吸光度;(2)如果此溶
液的浓度是0.420mg/100mL,其吸光度和百???比透光率各是多少? ;A = -lgT = Kbc
;A = -lgT = κ bc
;4 吸光度的加和性;下列说法正确的是______。
A 溶液的颜色是由吸收光决定的
B 分光光度法定量分析测定某吸光溶液的吸光度时,该溶液必须
是有色溶液
C 分光光度法,在某一波长处测得某溶液的T=1,说明该物质
对该波长处光全部吸收
D 吸光度不具有加和性;三 紫外-可见吸收光谱 ;
* 紫外-可见吸收曲线的形状取决于
物质的结构,物质分子结构不同,
具有不同的吸收曲线---定性分析
* 同种物质不同浓度的吸收曲线
形状和最大吸收波长不变;只是在
同一波长下吸光度随着浓度的增大
而增大----定量分析。
* 同一吸光物质在不同波长下的κ
是不同的。在最大吸收波长λmax
处摩尔吸光系数最大,表明该物质
此时吸光能力最强,次峰次之。用λmax
或次峰所对应的波长做入射光,进行定量分析。
* 吸收曲线也是吸光光度法选择测量波长的依据。;下列说法不正确的是______。
A 同种物质不同浓度的吸收曲线形状相似,最大吸收波长不变
B 同一吸光物质在不同波长下的摩尔吸光系数是不同的,最大
吸收波长λmax处摩尔吸光系数最大
C紫外-可见吸收曲线的形状取决于物质的结构,物质分子结构
不同,具有不同的吸收曲线
D 紫外-可见吸收曲线可用来定量分析;1 入射光波长的选择
;
若在最大吸收波长处存在干扰
物质时,依据“吸收最大,干
扰最小”,即干扰物质在此波
长下不吸收或吸收很弱。此时,
测定的灵敏度可能有所降低,
但能有效减少或消除共存物质
的干扰,提高测定的准确度。
选择方法:绘制光的吸收曲线
确定最佳波长。;2 参比(空白)溶液的选择 ;样品空白(试液空白):显色剂和其他试剂在测量波长处无吸收,
但待测试液中共存的其他组分有吸收且其他组分不与显色剂作用,
用不加显色剂的试液做参比,消除有色离子的干扰。;吸收池在使用过程中受化学腐蚀或受摩擦的程度不同,因此
在相同条件下测定的本底吸光度有差异,差异最小的同一规格
的吸收池称为配对池。
工作时,用空气空白或蒸馏水空白在一定波长下测定吸光度值,
选择配对池投入使用。
或使用同一个吸收池进行测量。;在相同条件下配制样品溶液和标准溶液,在最佳波长处和线性
范围内测定二者的吸光度A样和A标,进行比较。;有一标准Fe3+溶液,浓度为6.00ug/mL,其吸光度为0.304,而试样溶液在同一条件下测得吸光度为0.510,求试样溶液中Fe3+的含量(mg/L).;测定时,先取与被测物质含有相同组分的标准样品,配成一系列
浓度不同的标准溶液,置于相同厚度的吸收池中,在最佳波长处
分别测其吸光度。然后以溶液浓度c为横坐标,以相应的吸光度A
为纵坐标,绘制A-c曲线图,即为标准曲线(工作曲线)。;在相同条件下测出
样品溶液的吸光度,
从标准曲线上便可
查出与此吸光度对
应的样品溶液的浓
度。;★标准溶液数一般为5至7个点,
但至少要保证有5个点;
★标准溶液的浓度范围要有一
个比较大的跨度,保证样品
的浓度要在标准曲线浓度范
围之内,包括上限和下限;
★浓度差距最好是成倍增加
或等级增加;
★检测标准溶液时,应按浓度递增顺序进行,以减少高浓度
对低浓度的影响,提高准确性;
;c(ug/mL);★绘制坐标轴,且所代表的物理量、单位必须标明;
★取单位距离,确保实验数据仅最后一位为估读数据;
★描点,且各点必须标示出来;
★绘制标准曲线(过原点),若各点不在一直线,则可通过原
点,尽
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