组织化学技术教程2.pptVIP

第三章 组织化学的基本技术 组织化学发展到今天，它的技术多而复杂，但基本技术是容易掌握的。从样品的取材、固定剂的选择、切片的制备、孵育反应、各种溶液的配制以及光镜组织化学技术和电镜组织化学技术等，每项技术都有明确的要求和规范的操作程序。进行没项工作，应事先做好准备，按技术程序进行，可做一定的预备实验，效果稳定后，再开始实验研究，这样才能达到预期的科研效果。 ?一、 样品的取材 样品制备的第一步就是取材，取材的好坏关系到实验的结果。所以必须做好准备工作。如取材的器材；动物标本准备，一般轻微麻醉，迅速取材为好。现将取材的原则和具体要求分述如下： ⑴??刀剪锐利、洁净。 ⑵ 快速、准确、尽量保持生活状态，力争1 分钟之内放入固定液，最迟不能超过3分 钟。要清楚取材的部位和内部，对病理 组织还应做到以下几点： ①???材部位必须是主要病变区。 ② 必须取病灶与正常组织的交界区 ③ 必要时取远离病灶的正常组织做对照。 ⑶ 一刀切取，切取应在蜡版或滤纸上进行， 避免拉锯、牵拉或挤压等动作。 ⑷ 低温操作，防止自溶现象，通常以0℃-4℃ 的低温条件下操作为佳。 ⑸ 定位准确，取材时必须注意样品的定向和 定位，即头、尾、左、右以及上、下方向。 切好的样品贴放在滤纸片上，标记好定向标 志，防入预冷固定液内，或冰冻切片或短时 间冷冻保存。 ⑹ 样品大小