3.2体外受精和早期胚胎发育要点.ppt

一、试管动物技术 1、概念： 通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经过移植产生后代的技术 * * 3.2体外受精和早期胚胎培养 2、操作步骤： 第二步：胚胎的早期培养 （1）卵母细胞的采集和培养 （2）精子的采集和获能 （3）受精 第一步：体外受精 二、试管动物技术的过程 1、体外受精： ⑴卵母细胞的采集和培养 采集方法： ①超数排卵:用促性腺激素处理，从输卵管中冲取卵子。 注意：卵子能直接与获能的精子在体外受精。 （常用对象：实验动物如小鼠、兔，以及家畜猪、羊等） 注意：要在体外经人工培养成熟后，才能与精子结合完成受精。 ②刚屠宰母畜的卵巢中取卵或活体动物卵巢中取卵。 （常用对象：大家畜或大型动物，如牛等） ⑵精子的采集和获能 收集的方法： 获能的方法： 假阴道法、手握法、电刺激法 培养法: 化学诱导法: 如：啮齿动物、家兔和猪等 如：牛、羊等家畜 放入人工配制的获能液中 放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中 卵巢 卵母细胞 新鲜或解冻的精液 卵母细胞培养 精子离心处理 MⅡ期卵母细胞 精子获能处理 获能精子 体外受精 受精卵培养 在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程 ⑶受精 哺乳动物体外受精过程的示意图 2、胚胎的早期培养 培养液成分： 早期培养的目的： 两盐、两素、两酸、血清等 检查受精状况和受精卵的发育能力 牛、羊：桑椹胚或囊胚阶段 试管婴儿：8-16个细胞阶段 胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。 3、胚胎移植 不同动物胚胎移植时间不同。 体外受精 早期胚胎培养 卵母细胞的采集 精子的获取 受精： 条件： 培养液成分： 假阴道法 手握法 电刺激法 方法一：用促性腺激素处理，使其超数排卵，从输卵 管中冲取卵子 方法二：从屠宰母畜卵巢中采集 方法三：直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞 受精卵在发育培养液中培养 无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等 获能的精子 ＋培养成熟的卵子 完成受精 小结 *