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ELISA法检测抗体效价.data.
ELISA间接法检测抗体效价
实验原理：ELISA（Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay），酶联免疫吸附实验。指可溶性的抗原或抗体吸附到聚苯乙烯等固相载体上，进行免疫反应的定性和定量方法。?12H2O………………………3.58 g KH2PO4 ………………………………0.24 g
加入超纯水80 ml，充分溶解，HCl调节pH 7.2-7.4，超纯水定容至100 ml，过滤后4℃存放。
包被液：1000 ml NaHCO3………………………………2.93 g Na2CO3……………………………… 1.59 g
加入500 ml超纯水，调节pH值为9.6；补足超纯水至1000 ml。4℃存放待用。
洗涤液：500 ml 10×PBS ………………………………50 ml 超纯水…………………………………450 ml Tween 20………………………………0.25 ml
封闭液：100 ml（现用现配） 10×PBS………………………………10 ml FBS（胎牛血清）…………………… 5 ml 超纯水…………………………………85 ml Tween20………………………………0.1 ml
样品稀释液：100 ml 10×PBS………………………………10 ml 超纯水…………………………………90 ml
1×甲乙液： 100 ml（甲、乙液分别提前配好，临用前再取所需量混合） 甲液： 柠檬酸……………………………1.92 g 超纯水溶解，定容至100 ml。 乙液： Na2HPO4?12H2O…………………7.17 g 超纯水溶解，定容至100 ml。
滤过除菌，4℃存放待用。
临用前，取甲液4.86 ml与乙液5.14 ml混合，加OPD 4 mg（有毒，戴手套,4粒），待充分溶解后加入30%H2O250 ul，混匀即可。
甲液2.47ml 乙液2.53ml 水 5ml 4粒OPD 50ul过氧化氢
终止液：100 ml 浓硫酸……………………………………20 ml 缓慢加入80 ml超纯水中，边加边搅拌。
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