002-2植物硝酸根信号感受与传导途径20131015详解.pptVIP

植物硝酸根信号感受与传导途径 氮是维持植物生长发育必需的营养元素。硝酸根作为土壤中主要的氮源,在土壤中的浓度随环境条件的改变呈宽幅波动: 10 μM to 100 mM (Crawford 1995)。因此,植物进化出一系列的机制来主动调节其代谢及形态发育,以应对土壤中硝酸根浓度的剧烈变化(Stitt 1999)。 早在上世纪50年代,相关研究已经表明硝酸根可以作为信号分子强烈诱导并增强硝酸还原酶（NR）的活性(Tang和Wu 1957)。在随后的研究中,人们逐渐发现硝酸根作为信号分子,不仅诱导NR的表达,而且可以调控硝酸根转运蛋白以及碳氮代谢等途径中许多相关下游基因的mRNA水平(Coruzzi和Bush 2001)。 如何区分硝酸根的营养功能和信号功能？ 但对于植物如何感知硝酸根信号,以及感受后的信号如何进一步调控植物体内的基因表达以及代谢等生理过程,来调节植物与环境的相互作用的分子机理研究,直到最近几年才取得了较大的突破,下面分别就以上提到的几个方面进展进行阐述。 植物硝酸根信号感受与传导途径 一、硝酸根调控的基因表达 当植物感受到土壤中的硝酸根浓度变化时,会迅速调整一系列基因的表达来调节体内的代谢及生长发育(Vidal和Gutierrez 2008)。这些基因最显著的表达调控特征是迅速受到硝酸根的诱导, 被称为硝酸根初级响应基因,主要包括调控硝酸根吸收、还原以及磷酸戊糖途径和糖酵解途径相关的基因(Wang等2000)。 NR基因是第一个被发现的硝酸根初级响应基因(Tang和Wu 1957),使用10-50mmol·L-1的硝酸根处理植物时,其体内的mRNA含量在几分钟内即发生显著增加(Melzer等1989;Cheng等1991;Gowri等1992;Aslam等1993)。而且,在添加蛋白质合成抑制剂（cycloheximide，环己酰亚胺：抑制真核生物的肽基转移酶）后,硝酸根仍然能够迅速诱导NR的表达,表明硝酸根诱导NR的表达是独立于蛋白质从头合成的(Gowri等1992)。除NR外,硝酸根转运蛋白基因(NRT)也是非常重要的硝酸根初级响应基因,其典型代表是NRT2.1和NRT2.2。 Arabidopsis thaliana (L.) 50 mM KNO3 当植物受到硝酸根饥饿时,NRT2.1和NRT2.2的表达量会显著降低到不可检测的水平,但是一旦将植物转移至含硝酸根的培养基时,几分钟内即可诱导其表达(Forde 2000)。相对于硝酸根诱导的代谢变化等次级效应,硝酸根初级响应现象具有高度的稳定性,因此该过程中一些标志基因已经被广泛应用于研究硝酸根信号转导。 除了上述的初级响应基因,Wang等(2003)通过系统分析经过硝酸根饥饿和短时间低浓度(250μmol·L-1 NO3-/20 min)诱导处理的拟南芥转录组,发现拟南芥近10%基因的表达受到了硝酸根的影响。在根中1 176个基因出现显著上调或下调,在茎中也有183个基因的表达发生显著的改变。 除去之前发现的初级硝酸根响应基因外,还包括许多新的参与物质代谢或调控的基因,例如参与糖酵解途径的葡萄糖-6-磷酸异构酶以及磷酸甘油酸变位酶基因等,参与铁(Fe)转运和代谢基因(烟酰胺合成酶)、以及硫(S)元素吸收和还原的基因。这些结果表明矿物质硝酸根在植物基因表达中所能起到的核心调控作用(Wang等2003)。 但是,硝酸根作为一个氮代谢的原初底物分子,它在同化为有机氮的过程中被还原为亚硝酸根、铵根以及其他含氮的中间代谢产物,而这些代谢产物也可以作为信号分子调控基因的表达(Walch-Liu等2006;Wang等2007;Gutierrez等2008)。因此最初并不能确定硝酸根初级响应过程到底是由硝酸根自身直接引发,还是下游代谢产物造成,多个实验室利用来自不同物种的NR活力缺失突变体对这个问题进行了研究。 Scheible等(1997)用低NR活性烟草突变体进行的研究揭示,即使硝酸根不能被有效还原,也能调节烟草体内的碳氮代谢平衡过程,支持硝酸根作为信号分子起作用的假设。 更为精细的分子证据来自对拟南芥的研究,Wang等(2004)获得了NR酶活缺失的拟南芥双突变体nia1nia2,该突变体在以硝酸根为唯一氮源的培养基上无法正常生长。当该突变体和野生型同时接受硝酸根诱导处理时,有595个硝酸根初级响应基因在nia1nia2突变体和野生型中的表达都发生了显著变化。 这些基因涉及到能量、代谢、糖酵解和糖异生等重要的生理过程。通过这些工作,硝酸根的信号分子功能得以从其营养功能以及下游代谢产物的信号功能中严格区分出来,为硝酸根信号转导研究奠定了坚实的基础。 二、植物对硝酸根信号的感受 外界的硝酸根信号如何被植物所感知这个问题一直是研究的难点。Re