08第八章真菌毒素的检验详解.pptVIP

（1）酶联免疫吸附法-竞争抑制法测AFB1 试剂：TMB，30%H2O2，牛血清白蛋白，吐温-20 抗体：抗AFB1的特异性单克隆抗体 包被抗原：AFB1与载体蛋白的结合物 酶标二抗： 缓冲液：磷酸盐缓冲液、终止液1mol/L的硫酸 AFB1标准溶液： 步骤： 1.提取：10g样品+50ml乙腈-水 滤纸过滤 BSA洗液稀释 2.测定：包被抗原包被酶标微孔板 洗液洗去多余抗原 加AFB1标准溶液 加稀释抗体（37度1.5h) 洗液洗3次后，加酶标二抗（ 37度培养2h） 反复洗后加底物溶液 加终止液 （包被—加样---加酶标抗原和待测抗原---加底物显色—终止反应 （显色原理对照管由于只加酶标抗原，与固相抗体充分结合，故分解底物显色深；测定管的显色程度则随待测抗原和酶标抗原与固相抗体竞争结合的结果而异。如待测抗原量多，竞争性地抑制酶标抗原与固相抗体结合，使固相上结合的酶标抗原量减少。 固定OD值 微孔板 微 孔 表 面 情 况 AFB1包被抗体 . （2）赭曲霉毒素 毒性：主要对肾产生危害，造成肾肿大，当浓度超过5mg/kg时，对肝脏组织和肠道产生破坏，引起肠炎等。 特性：无色结晶化合物，易溶于极性溶剂和稀