发酵工艺学第二章精讲.ppt

(4)中间培养 中间培养：发生突变尚未表现出来前，有表现延迟的过程，需3代或以上繁殖才能将突变性状表现出来，此过程称为中间培养。 该过程对今后的筛选和获得稳定菌株都是极为重要的。 方法：将变异处理后的细胞放在液体培养基中培养几小时，让细胞的遗传物质复制，繁殖3代以上，以得到纯的变异细胞。 (5)分离和筛选 诱变筛选分两个阶段：初筛和复筛。 初筛：利用鉴别性培养基的原理，有效地把原先肉眼无法观察的生理性状或产量性状转化为“可视化”，将90%菌落淘汰。 复筛：主要根据生产性能进行筛选。 设计简便、高效的科学筛选方案。 初筛 筛选工作 复筛 以量为主（除去对生产无效的菌株） 以质为主（对少量潜力大的菌株的代谢产物量作精确测定） 初 筛 复 筛 对产量突变株生产性能的测定方法 粗测为主 在培养皿平板上 在摇瓶中 较精确的测定 摇瓶培养or台式自控发酵罐培养 在培养皿平板上，通过观察测定某突变菌落周围 淀粉酶变色圈（用碘液使淀粉显色）的大小， 柠檬酸变色圈（可在厚滤纸上培养，用溴甲酚绿作指示剂）的大小， 抗生素抑制圈的大小，指示菌生长圈的大小（测定生长因子产生），纤维素酶对纤维素水解圈（用刚果红染色）的大小，外毒素的沉淀反应圈的大小等， 初筛 在诱变种，营养缺陷型突变株（auxotrophic mutant）在生物学、应用研究以及生产实践上都有极其重要的意义。 1. 营养缺陷型（au