1、空气、皮肤、口腔中微生物分布测定技术详解.pptVIP

空气、皮肤、口腔中微生物分布测定技术 一、实验目的 1. 验证空气中微生物的存在 2. 掌握空气中微生物的检测方法 3. 验证人体的皮肤、口腔正常菌群的存在 4. 掌握人体正常菌群的检测技术 二、实验原理 悬浮在空气中的微生物落在适宜于它们生长的固体培养基表面，在适宜温度下培养一段时间后，每个分散的菌体或孢子就会形成一个个肉眼可见的细胞群体即菌落，通过观察菌落的特征和计数就可大致鉴别空气中微生物的种类和数量。 人体的皮肤表面存在各种微生物，用手在培养基表面划线，手的皮肤表面的微生物就接种到了培养基上，通过培养，肉眼就可以看到它们。 人的口腔也常有葡萄球菌、链球菌及其它细菌存在，对着培养基用力咳嗽，这些菌就接种到了培养基的表面，通过培养，肉眼就可以看到它们。 三、实验器材及试剂 酒精灯，37℃培养箱，培养皿，记号笔，医用棉签，酒精棉球，接种环，无菌水，营养琼脂培养基，马铃薯葡萄糖琼脂培养基。 四、实验步骤 （一）空气中微生物分布测定 1. 熔化培养基：电炉加热使培养基熔化。 2. 倒平板：将已熔化的培养基冷却至50℃左右，营养琼脂培养基倒平板2皿，待凝固，写上培养基名称，姓名，备用。 3. 检测：将这2皿培养皿置于室内并打开培养皿盖，使培养基暴露于空气中，10min后盖上培养皿盖。 4. 培养：将营养琼脂培养基平板置于37℃培养箱倒置培养48小时。 5. 观察并记录结果。 （二）皮肤中微生物分布测定 1. 熔化培养基：电炉加热使培养基熔化。 2. 倒平板：将已熔化的培养基冷却至50℃左右，营养琼脂培养基倒平板3皿，待凝固后分别如下记号：姓名，1、洗手前，2、洗手后，3、酒精消毒，备用。 3. 洗手前用右手食指在1号培养基的表面画“+”字。 4. 用洗手液洗手，以流水冲洗3min以上，用镊子取无菌棉球擦干右手食指，然后在2号培养基的表面画“+”字。 5.用酒精棉球消毒右手食指后，在3号培养基的表面画“+”字。 6.将上述平板倒置于37℃培养箱培养48小时。 7.观察结果并计数。 （三）口腔中微生物测定 1. 熔化培养基：电炉加热使培养基熔化。 2. 倒平板：将已熔化的营养琼脂培养基冷却至50℃左右，营养琼脂培养基倒平板2皿，待凝固用记号笔标上姓名，咳嗽，备用。 3.打开平板的盖子，将培养基置于距口腔约15cm处，对准培养基表面用力咳嗽3～4次，盖好盖子。 5. 将上述平板倒置于37℃培养箱培养48小时。 6. 观察并记录结果。 五、注意事项 1.倒平板时培养基的温度不能太高，否则培养皿盖上会有许多冷凝水，易造成污染。 2.培养时培养皿要注意倒置培养。 3.用手画“+”字时要轻，不要划破培养基。 4.计算菌落时，菌落边缘互相重叠时要分开计算。 六、思考题 1.空气中微生物分布测定结果记录。（可参照表6-1设计记录表格） 2.皮肤和口腔微生物分布结果记录。（可参照表6-2设计记录表格）