新紫外吸收光谱法及分子荧光光谱课件.pptVIP

概 述 概 述 概 述 分子吸收光谱的产生 分子吸收光谱的产生 分子吸收光谱的产生 分子吸收光谱的产生 吸收光谱的表示方法 有机物吸收光谱与电子跃迁 有机物吸收光谱与电子跃迁 有机物吸收光谱与电子跃迁 有机物吸收光谱与电子跃迁 有机物吸收光谱与电子跃迁 有机物吸收光谱与电子跃迁 有机物吸收光谱与电子跃迁 有机物吸收光谱与电子跃迁 苯环上助色基团对吸收带的影响  立体结构和互变结构的影响 溶剂的影响 溶剂的影响 溶剂的影响 溶剂的影响 生色团与助色团 红移与蓝移 一、基本组成 general process 2.单色器 分光光度计的类型 types of spectrometer 紫外吸收光谱的应用applications of UV 二、有机化合物结构辅助解析 structure determination of organic compounds 1.4 解析示例 分子荧光光谱法简介 Brief Introduction of Molecular Fluorescence 基本原理 2.电子激发态的多重度 2.激发态→基态的能量传递途径 非辐射能量传递过程 辐射能量传递过程 荧光光谱的特征 镜像规则的解释 荧光的产生与分子结构的关系 化合物的结构与荧光 影响荧光强度的因素 仪 器 荧光分析方法与应用 定量依据与方法 仪 器 光源 单色器 样品室 检测器 显示器 1. 光源(提供能量激发被测物质分子,使之产生电子光谱) 在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。 可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500 nm。 紫外区：氢、氘灯。发射180～400 nm的连续光谱。 将光源发射的复合光分解成波段较窄的单色光的光学系统。 ①入射狭缝：光源的光由此进入单色器,限制杂散光进入单色器内； ②准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束； ③色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅； ④聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝； ⑤出射狭缝。 3.样品室 样品室放置各种类型的吸收池（比色皿）和相应的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。 4.检测器 利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有光电池、光电管或光电倍增管。 5. 结果显示记录系统 检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和结果处理 1.单光束 简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。国产751，722，724 以及Beckman DU-8型都是单光束。 特点；价格便宜，光源波动性较大，主要用作定量分析，不适于定性分析 分光光度计的类型 types of spectrometer 2.双光束 将通过单色器的光一分为二，一束通过参比溶液，一束通过试样，仪器在不同时刻记载参比信号和样品信号。通过一次测量可测得溶液的吸光度。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响。仪器复杂，价格较高。国产710，730和740型都是双光束。 3.双波长 将不同波长的两束单色光(λ1、λ2) 快束交替通过同一吸收池而后到达检测器。测出吸光度差△A 。 特点：无需参比池。只用一个待测试样，完全扣除背景，提高了准确度。 △A =（ ? λ1 - ? λ2 ）cL 优点：不用测量参比溶液，完全扣除了背景，准确度高无需联立方程。 一、定性、定量分析 qualitative and quantitative analysis 1. 定性分析 ?max：化合物特性参数，可作为定性依据； 有机化合物紫外吸收光谱是简单而宽的吸收带,没有精细结构,标志性差。反映结构中生色团和助色团的特性，不完全反映分子特性；用紫外光谱推测分子结构很困难。 标准谱图库：46000种化合物紫外光谱的标准谱图 ?The sadtler standard spectra ,Ultraviolet? ?1.1 可获得的结构信息 （1） 200-400nm 无吸收峰。饱和化合物，单烯。 （2） 270-350 nm有吸收峰（ε=10-100）醛酮 n→π* 跃迁产生的R 带。 （3） 250-300 nm 有中等强度的吸收峰（ε=200-2000），芳环的特征 吸收（具有精细解构的B带）。 （4） 200-250 nm有强吸收峰（ε?104），表明含有一个共轭体系（K带)。共轭二烯：K带（?230 nm）；????不饱和醛酮：K带?230 nm