HPLC内标法测定原料药中对-乙酰氨基酚的含量.doc

HPLC内标法测定原料药中对-乙酰氨基酚的含量 一、实验目的 1、掌握内标法测定 2、熟悉的使用方法 二、实验原理 分别配制含有内标物的对准品溶液和试样溶液，由对照品中组分i和内标物s的Ai’和As’计算相对校正因子f，再由试样中待测组分i和内标物s的Ai和As计算待测组分的含量，有 三、色谱条件 色谱柱：C18柱（15cm×4.6cm，5μm）；流动相：甲醇-水（60:40）；流速0.6ml/min；检测器：UV 257nm；柱温：室温；内标物：咖啡因。 四、实验步骤 1、溶液配制 称取?m的微孔滤膜，取滤液即得。 称取对-乙酰氨基酚样品 mg，内标物咖啡因 mg，相同方法配制样品溶液。 2、实验部分 打开仪器各部电源，更换流动相，设置泵流量，排气；设置检测波长257nm；打开工作站，设置参数，查看基线。 基线平稳后，注入对照品溶液，重复3次进样。记录保留时间、半峰宽、峰面积等参数。 注入试样溶液，重复3次进样。记录保留时间、半峰宽、峰面积等参数。 实验完毕关检测器电源，更换流动相，冲洗色谱柱和进样阀。 五、数据处理要求 1、公式 2、结果表格（另附） 3、运算示例 要求：先计算校正因子再求结果平均值。 六、思考题 P157 3，5； 另加： 内标法有何优缺点？