鱼类雌核发育的鉴定试题.ppt

第三节 雌核发育二倍体的鉴定 作者：宋庆洋 鱼类的进化地位 鱼类最早出现在距今4亿年前的寒武纪 是最早出现的脊椎动物 是由水生向陆生过渡的种类 （一） 雌核发育（Gynogenesis） 1.定义 雌核发育是指卵子须经精子激发才能产生只具有母系遗传物质的个体的有性生殖方式。 雌核发育需要同种精子或异种精子刺激，起诱发作用，但不参与发育 (1)天然雌核发育 (2)人工诱导雌核发育 天然雌核发育 天然雌核发育卵子的发生与两性融合生殖的鱼类不同之处，在于它只进行一次成熟分裂，排出的卵子处于第一次成熟分裂中期。 天然雌核发育 1）卵子具有与母本完全相同的染色体组型 2）卵子被近缘两性型种类雄鱼的精子激发后才能发育，但精子只起激发作用，并未发生雌雄原核的融合或配子配合。 3）后代不具父本性状。 4）银鲫中，除某些种类外，所有雌核发育后代全为雌性，表现型似母本，基因型与母本相同或不尽相同，视卵核发育的途径而定。 人工诱导雌核发育（二倍体） 染色体的倍性 各种生物的染色体数目一般是恒定的，它们在体细胞中成对，在性细胞中成单。通常用n表示性细胞染色体数目。 天然雌核发育鱼类的鉴别 3.人工授精卵的细胞学观察 A：人工授精卵切片光镜观察（精核始终保持密致状态） B：囊胚细胞压片镜检（检测染色体数目） * * * 尽管阻止极体的排出以及抑制第一次有丝分裂都能获得雌核发育二倍体，但二倍体的性质并不相同，所以认定各种处理后所产生的雌核发育二倍体的来源是很重要的，除受精细胞学观察外，遗传标记也能提供到底是由阻止第一有丝分裂还是由于阻止极体排出而导致雌核发育二倍体的证据。如果二倍体是由第一次有丝分裂的抑制而导致的，由于它们的两个染色体组来源于一套染色体的复制，因此遗传组成完全相同，是100%的纯合体，而第一极体排出的抑制，对接近着丝点的基因来说，应该导致几乎100%的杂合体后裔，但这未必是可能的，因为第一极体的排出通常是在受精后完成的，至于第二极体排出的抑制，对接近着丝点的基因来说，将主要导致纯合后裔，而对远离着丝点的基因来说，则导致杂合体比例的增加，而对那些与其着丝点自由分离的基因来说，2/3 后裔应该是杂合的。 单倍体 n 二倍体 2n 三倍体 3n * 第三节 雌核发育二倍体的鉴定 （一）天然雌核发育鱼类的鉴别（以方正银鲫和普安鲫为例） 1.人工繁殖：用正常鲤鱼精子与排出的成熟卵作人工授精，子代不具一对吻端须 * 2.辐射精子人工繁殖：遗传失活鲤鱼精子作人工授精，发育的胚胎不出现辐射雌核发育单倍体综合症，孵出仔鱼正常。 绝大多数的动物单倍体，其胚胎多表现为脑部S形，尾部短而弯曲，水肿，围心腔扩大及心血管畸形等单倍体综合症。 由于生理上不正常，一般在胚胎发育期就会死亡。 天然雌核发育鱼类的鉴别 * 4.视泡期胚胎脑部形态观察 人工雌核发育单倍体胚胎（与失活精子人工授精）脑部呈S形畸形，而天然雌核发育及人工雌核发育二倍体胚胎脑部正常。 5.红细胞大小 方正银鲫红细胞及核的长径、短径、面积、体积均大于二倍体野鲫，即二倍体与三倍体的核体积和面积各达到了预定的比例1：1.5和1：1.3 天然雌核发育鱼类的鉴别 * 6.肝脏及肝细胞的大小 方正银鲫的整个肝脏几乎覆盖整个肠管，重量约重体重的6-7%，胞质稀疏；鲫的肝脏分布肠管之间，胞质浓，方正银鲫肝重为鲫的二倍 7.体细胞染色体计数 就方正银鲫和普安鲫等天然雌核发育鲫鱼而言，染色体数目基本为150+-。而一般进行两性生殖的鲫鱼，且雌、雄性原核融合者，其染色体数目多在100。 8.侧线鳞数目 鲫侧线鳞片数小于30；银鲫侧线鳞大于30。 天然雌核发育鱼类的鉴别 * （二）人工雌核发育二倍体的鉴定 采用与母性有亲缘关系的另一种鱼类的辐射精子，此时，任何父性遗传可以通过下列几种方法识别出来： a.杂种是不能存活的（产生了单倍体后代） b.杂种在形态上是可以识别的 c.杂种在生化上是可以识别的 * 鲤鱼 1.形态判别 青色显性 红色隐性 体色 散鳞隐性 全鳞显性 鳞片 * 红鲤（红色）♀ 普通鲤（青色）♂ 红色、全鳞：雌核 青色、全鳞：杂合 F1 × 精子经UV照射 * 红镜鲤♀ （红色、散鳞） 镜鲤♂ （青色、散鳞） 红色、散鳞：雌核 青色、散鳞：杂合 F1 × 精子经UV照射 * 散鳞后代：雌核 F1 × 精子经UV照射 散鳞镜鲤♀ （ss） 全鳞镜鲤♂ （SS，Ss） Nagy等（1978） * 1.鲤鱼的运铁蛋白谱带：a-f，红鲤8305E等位基因纯合带，g.其他鲤个体的A等位基因纯合带 2.酯酶同工酶在鲤各组织中的表达L.肝，E眼，H心，B脑，M